山梔茶抗抑郁活性部位及其化學(xué)成分研究.pdf

1、抑郁癥(depression)是一種以顯著而持久的心境低落為主要臨床特征的綜合癥,嚴(yán)重者甚至出現(xiàn)自殺等極端自殘的行為,已成為嚴(yán)重威脅了人類身心健康的世界致殘性疾病,目前治療主要以化學(xué)藥物為主,常用抗抑郁藥物多存在耐藥性和不良反應(yīng),因此從中藥和天然藥物中發(fā)現(xiàn)抗抑郁中藥和活性成分具有重要的理論意義和應(yīng)用價值。山梔茶(Radix Pittospori)系海桐花科海桐花屬植物莽草海桐(Pittosporum illicioides Makino

2、)的干燥根,主要分布于我國西南及陜西南部、浙江、福建、臺灣等地,主產(chǎn)貴州,植物資源豐富。77版《中國藥典》記載:山梔茶具有鎮(zhèn)靜、降血壓功效,用于神經(jīng)衰弱,失眠多夢,高血壓癥;《中藥大辭典》記載有活絡(luò)止痛、寧心益腎功效。山梔茶為安神類中藥,在貴州民間(苗族)多用于治療神經(jīng)衰弱,是貴州少數(shù)民族用藥。本課題擬對山梔茶藥理活性和化學(xué)成分進行研究,為尋找其活性成分,擴大臨床應(yīng)用范圍,有效控制山梔茶藥材質(zhì)量,創(chuàng)制中藥新藥,充分利用藥材資源和開發(fā)民族

3、用藥提供科學(xué)依據(jù)。
　　中醫(yī)治療抑郁癥以養(yǎng)心安神、補益心脾、滋補肝腎為主。山梔茶雖有鎮(zhèn)靜、寧心安神功效,但有關(guān)山梔茶抗抑郁藥效考察及其活性成分的研究尚未見報道,值得進一步研究與開發(fā)。因山梔茶常用提取工藝為水煎法和醇沉法,故本研究首先對山梔茶水提物和醇提物進行抗抑郁試驗,抑郁模型為慢性不可預(yù)見性刺激應(yīng)激模型,采用小鼠強迫游泳運動實驗和懸尾實驗來觀察山梔茶抗抑郁試驗效果,結(jié)果顯示:山梔茶的水提物和醇提物能顯著縮短小鼠懸尾試驗和強迫游泳

4、試驗的不動時間,有明顯抗抑郁作用,兩者作用與抗抑郁藥氟西汀相當(dāng)。
　　為了進一步尋找山梔茶的活性部位,本課題先用溶劑萃取法把醇提物分為石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇等4個部位,采用小鼠懸尾實驗和強迫游泳運動實驗為方法,以小鼠持續(xù)不動時間為指標(biāo)評價各部位的抗抑郁藥理活性,結(jié)果顯示:山梔茶4個不同極性部位均不同程度地縮短絕望模型中小鼠懸尾和強迫游泳的不動時間。其中以乙酸乙酯部位和正丁醇部位最為顯著,即山梔茶抗抑郁活性成分主要分布在

5、乙酸乙酯部位和正丁醇部位。
　　為了系統(tǒng)地了解山梔茶的化學(xué)成分和活性成分,本課題先后用95％乙醇和70%乙醇對山梔茶進行提取,再通過不同極性溶劑對醇提物進行系統(tǒng)分離,以活性追蹤為指導(dǎo),對山梔茶抗抑郁活性部位(乙酸乙酯部位和正丁醇部位)采用硅膠、AB-8大孔樹脂、sephadexLH-20凝膠、ODS等柱層析純化,共分離到27個單體化合物,經(jīng)理化常數(shù)測定及光譜分析(如UV、IR、NMR、MS,特別是二維核磁共振譜圖的應(yīng)用)等手段,鑒

6、定了其中20個化合物結(jié)構(gòu),其中4個蒽醌類化合物,4個木脂素,4個三萜及其苷類,2個香豆素,2個脂肪酸,1個苯酞類化合物,1個萘酸酯,1個甾醇和1個芳香酸。在這些化合物中,3個為新化合物,分別為:(S)-4,7-二甲氧基-3-乙基苯酞((S)-3-ethyl-4,7-dimethoxyphthalide,4),3-氧基-20-脫甲異木油樹-14(15)-烯-28,30-二酸(3-oxo-20-demethylisoaleuritolic-

7、14(15)-ene-28,30-dioicacid,6),22-乙?；?21-(2-乙酰氧基-2-甲基丁?；?-R1-玉蕊醇(21-(2-acetoxy-2-methylbutanoyl)-22-acetyl-R1-barrigenol,11);1個為新天然產(chǎn)物即4,4-二甲基庚二酸(4,4-dimethyl--heptanedioicacid,8)。16個已知化合物分別鑒定為:大葉茜草素(mollugin,1)、硬脂酸(steari

8、cacid,2)、豆甾醇(stigmasterol,3)、6,7-二甲氧基香豆素(6,7-dimethoxycoumarin,5)、7-羥基-6-甲氧基香豆素(7-hydroxy-6-methoxycoumarin,7)、1,3-二羥基蒽醌(1,3-dihydroxy-9,10-anthraquinone,9)、3α-羥基-20-脫甲異木油樹-14(15)-烯-28,30-二酸(3α-hydroxyl-20-demethylisoale

9、uritolic-14(15)-ene-28,30-dioicacid,10)、丁香酸(syringicacid,12)、浙貝素即2-(3',5'-二甲氧基-4'-羥苯基)-3,7-二氧雜環(huán)[3,3,O]辛酮-6(zhebeiresinolor2-(3',5'-dimethoxy-4'-hydroxyphenyl)-3,7-dioxabicyclo[3,3,O]octan-6-one,13)、丁香脂素(syringaresinol,14

10、)、丁香脂醇雙葡萄糖苷(syringaresinol-4',4'-O-bis-β-D-glucoside,15)、1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌(2-methyl-1,3,6-trihydroxy-9,10-anthraquinone,16)、8-O-4/8-O-4-脫氫阿魏酸三聚體(8-O-4/8-O-4-dehydrotriferulicacid,17)、1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌-3-O-α-鼠李糖(1→2)-β-D-(6

11、'-O-乙?；?葡萄糖苷(2-methyl-1,3,6-trihydroxy-9,10-anthraquinone-3-O-α-rhamnosyl(1→2)-β-D-(6'-O-acetyl)glucoside,18)、1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌-3-O-α-鼠李糖(1→2)-β-D-葡萄糖苷(2-methyl-1,3,6-trihydroxy-9,10-anthraquinone-3-O-α-rhamnosyl(1→2)-β-D

12、-glucoside,19)、22-乙?；?21-(2-乙酰氧基-2-甲基丁酰基)-R1-玉蕊醇-3-O-β-D-葡萄糖-(1→2)-α-L-阿拉伯糖(1→3)-β-D-葡萄糖醛酸苷(3-O-{β-D-glucopyranosyl-(1→2)-[α-L-arabinopyranosyl-(1→3)]-β-D-glcuronopyranosyl-(1→)}-21-(2-acetoxy-2-methylbutyryl)-22-acetyl-