單核細(xì)胞趨化蛋白-1、細(xì)胞間粘附分子-1在病毒性面癱小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)的動(dòng)態(tài)表達(dá)及意義.pdf

1、本文從以下幾部分進(jìn)行論述：
　　第一部分 單核細(xì)胞趨化蛋白-1在病毒性面癱小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)的動(dòng)態(tài)表達(dá)及意義
　　目的:
　　通過建立1型單純皰疹病毒（herpes simplex virus type1，HSV-1）導(dǎo)致小鼠面癱的動(dòng)物模型，探討單核細(xì)胞趨化蛋白-1(monocyte chemoattractantprotein-1，MCP-1)在病毒性面癱小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)中表達(dá)的變化規(guī)律及糖皮質(zhì)激素對MCP-1表達(dá)

2、的作用。
　　方法:
　　將170只Balb/c雄性四周齡小鼠隨機(jī)分為病毒接種組（135只），生理鹽水對照組（26只）和空白對照組（9只）。病毒接種組中面癱小鼠又分為A、B、C亞組，用于干預(yù)的藥物為甲基潑尼松龍琥珀酸鈉(methylprednisolonesodium succinate，MPSS)和糖皮質(zhì)激素受體阻斷劑(RU486)。A組不進(jìn)行任何藥物干預(yù)，B組為應(yīng)用MPSS進(jìn)行干預(yù)組，C組為應(yīng)用MPSS+RU486干預(yù)組

3、。將HSV1接種至小鼠耳廓背面皮膚建立面癱動(dòng)物模型，評估小鼠面神經(jīng)功能，用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time PCR)、蛋白質(zhì)印跡法(western blot)及免疫組化技術(shù)檢測小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)中MCP-1的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1.在病毒接種組小鼠中有95只(55.88％)于接種后2-5天出現(xiàn)不同程度的面癱癥狀，取其中65只進(jìn)入本部分研究。
　　2.免疫組化檢測顯示，面癱后MCP-1蛋白在腦干面神經(jīng)核團(tuán)中神經(jīng)

4、元胞漿、細(xì)胞間質(zhì)表達(dá)增強(qiáng)，與空白對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　3.MCP-1mRNA在生理鹽水組小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)表達(dá)處于低水平，與空白組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。在病毒接種組小鼠，面癱后6h可見MCP-1mRNA表達(dá)升高，2d達(dá)到高峰，與空白對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，此后表達(dá)逐漸降低并趨于正常(P＞0.05)。
　　4.MCP-1蛋白在生理鹽水組小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)表達(dá)處于低

5、水平，與空白組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。在病毒接種組小鼠，面癱后6h可見MCP-1蛋白表達(dá)升高，2d達(dá)到高峰，與空白對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，此后表達(dá)逐漸降低，但仍高于空白對照組(P＜0.05)。
　　5.在HSV-1+MPSS組，MCP-1蛋白的表達(dá)在面癱后第2天明顯下降(P＜0.05)。
　　6.在HSV-1+MPSS+RU486組，MPSS對MCP1蛋白表達(dá)的抑制作用被減弱(P＜0.05)

6、。
　　結(jié)論:
　　1.提示MCP-1參與了HSV-1致小鼠面癱的病理過程。
　　2.MPSS對于貝爾面癱的治療作用可能通過對MCP-1的抑制作用來實(shí)現(xiàn)。
　　第二部分 細(xì)胞間粘附分子-1在病毒性面癱小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)的動(dòng)態(tài)表達(dá)及意義
　　目的:
　　探討細(xì)胞間粘附分子-1（intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1）在病毒性面癱小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)中表達(dá)的變化規(guī)律

7、及糖皮質(zhì)激素對ICAM-1表達(dá)的作用。
　　方法:
　　取第一部分實(shí)驗(yàn)中A、B、C組標(biāo)本進(jìn)入本部分實(shí)驗(yàn)研究。用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time PCR)、蛋白質(zhì)印跡法(western blot)及免疫組化技術(shù)檢測小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)中ICAM-1的表達(dá)。空白對照組標(biāo)本亦取自第一部分實(shí)驗(yàn)。
　　結(jié)果:
　　1.免疫組化檢測顯示，面癱后ICAM-1蛋白在腦干面神經(jīng)核團(tuán)神經(jīng)元胞漿、膜表達(dá)增強(qiáng)，與空白對照組相比差異有

8、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)
　　2.ICAM-1mRNA在生理鹽水組小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)表達(dá)處于低水平，與空白組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。在病毒接種組小鼠，面癱后6h可見ICAM-1mRNA表達(dá)升高，2d達(dá)到高峰，與空白對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，此后表達(dá)逐漸降低并趨于正常(P＞0.05)。
　　3.ICAM-1蛋白在生理鹽水組小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)表達(dá)處于低水平，與空白組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.

9、05)。在病毒接種組小鼠，面癱后6h可見ICAM-1蛋白表達(dá)升高，2d達(dá)到高峰，與空白對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，此后表達(dá)逐漸降低，但仍高于正常(P＜0.05)。
　　4.在HSV-1+MPSS組，ICAM-1蛋白的表達(dá)在面癱后第2天明顯下降(P＜0.05)。
　　5.在HSV-1+MPSS+RU486組，MPSS對ICAM-1蛋白表達(dá)的抑制作用被減弱(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.提示I

10、CAM-1參與了HSV-1致小鼠面癱的病理過程。
　　2.MPSS對于貝爾面癱的治療作用可能通過對ICAM-1的抑制作用來實(shí)現(xiàn)。
　　第三部分 單核細(xì)胞趨化蛋白-1抑制劑-Bindarit對病毒性面癱小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)單核細(xì)胞趨化蛋白-1、細(xì)胞間粘附分子-1表達(dá)影響及意義
　　目的:
　　探討單核細(xì)胞趨化蛋白-1抑制劑Bindarit對病毒性面癱小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)中MCP-1、ICAM-1表達(dá)的影響，確定MCP-

11、1與ICAM-1是否存在相關(guān)性。
　　方法:
　　取第一部分實(shí)驗(yàn)中30只面癱小鼠進(jìn)入本部分實(shí)驗(yàn)研究。應(yīng)用Bindarit連續(xù)干預(yù)2d后取小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)標(biāo)本。用蛋白質(zhì)印跡法(western blot)檢測小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)中MCP-1及ICAM-1的表達(dá)?？瞻讓φ战M標(biāo)本亦取自第一部分實(shí)驗(yàn)。
　　結(jié)果:
　　1.Bindarit干預(yù)后，MCP-1蛋白的表達(dá)在面癱后第2天明顯下降(P＜0.05)。
　　2.B