實(shí)驗(yàn)性腦梗死后腦組織單核細(xì)胞趨化蛋白-1的動(dòng)態(tài)表達(dá)及意義.pdf

1、目的：缺血性腦血管病是臨床常見病和多發(fā)病，具有發(fā)病率、致殘率及復(fù)發(fā)率高的特點(diǎn)，嚴(yán)重威脅著人類的健康。腦梗死后腦水腫是臨床病情加重的主要原因，但至今對(duì)其病理生理機(jī)制的認(rèn)識(shí)尚不完善，近年來(lái)，炎癥反應(yīng)在其中的作用逐漸受到重視。單核細(xì)胞趨化蛋白-1(monocytechemoattractantprotein-1，MCP-1)可趨化和激活單核細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞等免疫細(xì)胞，促進(jìn)多種細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)分泌，參與腦缺血再灌注損傷、創(chuàng)傷性腦損

2、傷、實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎、AIDS腦病和中樞神經(jīng)系統(tǒng)(centralnervoussystem，CNS)腫瘤等的病理過程，已成為目前研究的熱點(diǎn)。而有關(guān)MCP-1與永久性腦缺血的研究在國(guó)內(nèi)外較少。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)大鼠局灶性腦缺血損傷后缺血灶周圍MCP-1表達(dá)的動(dòng)態(tài)研究，探討MCP-1在腦缺血損傷中的重要作用，并進(jìn)一步明確炎癥反應(yīng)在腦缺血損傷中的發(fā)生機(jī)制，從而為臨床治療缺血性腦血管病提供更為有利的理論依據(jù)。 方法：采用健康雄性Spr

3、ague-Dawley大鼠，參照等的線栓法制作大鼠右側(cè)大腦中動(dòng)脈閉塞(middlecerebralarteryocclusion，MCAO)的動(dòng)物模型。在模型成功后6h、24h、48h、72h和7d分別用Longa評(píng)分法、肢體對(duì)稱試驗(yàn)評(píng)分法、Berderson評(píng)分法、平衡木評(píng)分法對(duì)大鼠進(jìn)行行為學(xué)評(píng)分。評(píng)分后各組大鼠在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)斷頭處死，迅速取出完整腦組織，去除嗅球及額極前部4mm的腦組織，取之后相鄰2mm層厚的腦組織，病變同側(cè)和對(duì)側(cè)前部

4、腦組織分別進(jìn)行腦含水量測(cè)定。稱取濕重(Wetweight，WW)和干重(Dryweight，DW)，按照公式：(WW-DW)/WW×100％，計(jì)算腦組織的含水量。將測(cè)定含水量后的剩余腦組織冠狀切成4mm厚經(jīng)固定后石蠟包埋，制作石蠟切片，進(jìn)行常規(guī)HE染色，觀察大鼠腦組織缺血區(qū)形態(tài)及其周圍的水腫帶、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞的改變；相鄰組織切片進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，觀察MCP-1在腦缺血后腦組織中表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律。 結(jié)果：大鼠

5、在MCAO后手術(shù)對(duì)側(cè)肢體存在不同程度癱瘓，6h時(shí)由于術(shù)中麻醉和手術(shù)創(chuàng)傷，每組均有明顯的行為學(xué)異常，沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；24h～72h時(shí)神經(jīng)功能缺損明顯，假手術(shù)組和腦梗死組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。腦梗死組病變側(cè)的含水量在6h和7d與假手術(shù)組比較無(wú)明顯差別，在24h、48h和72h與假手術(shù)組比較均存在顯著性差異，P＜0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在48h腦梗死組病變側(cè)與病變對(duì)側(cè)之間存在顯著性差異，P＜0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余時(shí)間點(diǎn)無(wú)明顯差別；假手術(shù)組病

6、變側(cè)與病變對(duì)側(cè)之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差別。梗死灶周圍存在明顯的組織水腫，24h出現(xiàn)炎細(xì)胞，以單核細(xì)胞為主，48h炎細(xì)胞浸潤(rùn)以分葉核的中性粒細(xì)胞為主，單核細(xì)胞逐漸減少，假手術(shù)組腦組織未見神經(jīng)細(xì)胞損傷，沒有出現(xiàn)明顯的病理改變。MCP-1陽(yáng)性細(xì)胞可見于小膠質(zhì)細(xì)胞，神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞。腦梗死組病變側(cè)腦組織在6hMCP-1陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)開始增加，24h達(dá)到高峰，與假手術(shù)組比較，在6h、24h、48h、72h有顯著性差異，P＜0.05；兩側(cè)腦組織陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)比較