實驗性腦梗死后腦組織單核細胞趨化蛋白-1的動態(tài)表達及意義.pdf

1、目的：缺血性腦血管病是臨床常見病和多發(fā)病，具有發(fā)病率、致殘率及復發(fā)率高的特點，嚴重威脅著人類的健康。腦梗死后腦水腫是臨床病情加重的主要原因，但至今對其病理生理機制的認識尚不完善，近年來，炎癥反應在其中的作用逐漸受到重視。單核細胞趨化蛋白-1(monocytechemoattractantprotein-1，MCP-1)可趨化和激活單核細胞、小膠質細胞、T淋巴細胞等免疫細胞，促進多種細胞因子和炎癥介質分泌，參與腦缺血再灌注損傷、創(chuàng)傷性腦損

2、傷、實驗性自身免疫性腦脊髓炎、AIDS腦病和中樞神經系統(tǒng)(centralnervoussystem，CNS)腫瘤等的病理過程，已成為目前研究的熱點。而有關MCP-1與永久性腦缺血的研究在國內外較少。本實驗通過對大鼠局灶性腦缺血損傷后缺血灶周圍MCP-1表達的動態(tài)研究，探討MCP-1在腦缺血損傷中的重要作用，并進一步明確炎癥反應在腦缺血損傷中的發(fā)生機制，從而為臨床治療缺血性腦血管病提供更為有利的理論依據(jù)。 方法：采用健康雄性Spr

3、ague-Dawley大鼠，參照等的線栓法制作大鼠右側大腦中動脈閉塞(middlecerebralarteryocclusion，MCAO)的動物模型。在模型成功后6h、24h、48h、72h和7d分別用Longa評分法、肢體對稱試驗評分法、Berderson評分法、平衡木評分法對大鼠進行行為學評分。評分后各組大鼠在相應時間點斷頭處死，迅速取出完整腦組織，去除嗅球及額極前部4mm的腦組織，取之后相鄰2mm層厚的腦組織，病變同側和對側前部

4、腦組織分別進行腦含水量測定。稱取濕重(Wetweight，WW)和干重(Dryweight，DW)，按照公式：(WW-DW)/WW×100％，計算腦組織的含水量。將測定含水量后的剩余腦組織冠狀切成4mm厚經固定后石蠟包埋，制作石蠟切片，進行常規(guī)HE染色，觀察大鼠腦組織缺血區(qū)形態(tài)及其周圍的水腫帶、炎性細胞浸潤、神經元和膠質細胞的改變；相鄰組織切片進行免疫組織化學染色，觀察MCP-1在腦缺血后腦組織中表達的動態(tài)變化規(guī)律。 結果：大鼠

5、在MCAO后手術對側肢體存在不同程度癱瘓，6h時由于術中麻醉和手術創(chuàng)傷，每組均有明顯的行為學異常，沒有統(tǒng)計學意義；24h～72h時神經功能缺損明顯，假手術組和腦梗死組比較有統(tǒng)計學意義。腦梗死組病變側的含水量在6h和7d與假手術組比較無明顯差別，在24h、48h和72h與假手術組比較均存在顯著性差異，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義；在48h腦梗死組病變側與病變對側之間存在顯著性差異，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，其余時間點無明顯差別；假手術組病

6、變側與病變對側之間無統(tǒng)計學差別。梗死灶周圍存在明顯的組織水腫，24h出現(xiàn)炎細胞，以單核細胞為主，48h炎細胞浸潤以分葉核的中性粒細胞為主，單核細胞逐漸減少，假手術組腦組織未見神經細胞損傷，沒有出現(xiàn)明顯的病理改變。MCP-1陽性細胞可見于小膠質細胞，神經元和星形膠質細胞。腦梗死組病變側腦組織在6hMCP-1陽性細胞數(shù)開始增加，24h達到高峰，與假手術組比較，在6h、24h、48h、72h有顯著性差異，P＜0.05；兩側腦組織陽性細胞數(shù)比較