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文檔簡介
1、目的:缺血性腦血管病是臨床常見病和多發(fā)病,具有發(fā)病率、致殘率及復(fù)發(fā)率高的特點,嚴(yán)重威脅著人類的健康。腦梗死后腦水腫是臨床病情加重的主要原因,但至今對其病理生理機(jī)制的認(rèn)識尚不完善,近年來,炎癥反應(yīng)在其中的作用逐漸受到重視。單核細(xì)胞趨化蛋白-1(monocytechemoattractantprotein-1,MCP-1)可趨化和激活單核細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞等免疫細(xì)胞,促進(jìn)多種細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)分泌,參與腦缺血再灌注損傷、創(chuàng)傷性腦損
2、傷、實驗性自身免疫性腦脊髓炎、AIDS腦病和中樞神經(jīng)系統(tǒng)(centralnervoussystem,CNS)腫瘤等的病理過程,已成為目前研究的熱點。而有關(guān)MCP-1與永久性腦缺血的研究在國內(nèi)外較少。本實驗通過對大鼠局灶性腦缺血損傷后缺血灶周圍MCP-1表達(dá)的動態(tài)研究,探討MCP-1在腦缺血損傷中的重要作用,并進(jìn)一步明確炎癥反應(yīng)在腦缺血損傷中的發(fā)生機(jī)制,從而為臨床治療缺血性腦血管病提供更為有利的理論依據(jù)。 方法:采用健康雄性Spr
3、ague-Dawley大鼠,參照等的線栓法制作大鼠右側(cè)大腦中動脈閉塞(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)的動物模型。在模型成功后6h、24h、48h、72h和7d分別用Longa評分法、肢體對稱試驗評分法、Berderson評分法、平衡木評分法對大鼠進(jìn)行行為學(xué)評分。評分后各組大鼠在相應(yīng)時間點斷頭處死,迅速取出完整腦組織,去除嗅球及額極前部4mm的腦組織,取之后相鄰2mm層厚的腦組織,病變同側(cè)和對側(cè)前部
4、腦組織分別進(jìn)行腦含水量測定。稱取濕重(Wetweight,WW)和干重(Dryweight,DW),按照公式:(WW-DW)/WW×100%,計算腦組織的含水量。將測定含水量后的剩余腦組織冠狀切成4mm厚經(jīng)固定后石蠟包埋,制作石蠟切片,進(jìn)行常規(guī)HE染色,觀察大鼠腦組織缺血區(qū)形態(tài)及其周圍的水腫帶、炎性細(xì)胞浸潤、神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞的改變;相鄰組織切片進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色,觀察MCP-1在腦缺血后腦組織中表達(dá)的動態(tài)變化規(guī)律。 結(jié)果:大鼠
5、在MCAO后手術(shù)對側(cè)肢體存在不同程度癱瘓,6h時由于術(shù)中麻醉和手術(shù)創(chuàng)傷,每組均有明顯的行為學(xué)異常,沒有統(tǒng)計學(xué)意義;24h~72h時神經(jīng)功能缺損明顯,假手術(shù)組和腦梗死組比較有統(tǒng)計學(xué)意義。腦梗死組病變側(cè)的含水量在6h和7d與假手術(shù)組比較無明顯差別,在24h、48h和72h與假手術(shù)組比較均存在顯著性差異,P<0.05,有統(tǒng)計學(xué)意義;在48h腦梗死組病變側(cè)與病變對側(cè)之間存在顯著性差異,P<0.05,有統(tǒng)計學(xué)意義,其余時間點無明顯差別;假手術(shù)組病
6、變側(cè)與病變對側(cè)之間無統(tǒng)計學(xué)差別。梗死灶周圍存在明顯的組織水腫,24h出現(xiàn)炎細(xì)胞,以單核細(xì)胞為主,48h炎細(xì)胞浸潤以分葉核的中性粒細(xì)胞為主,單核細(xì)胞逐漸減少,假手術(shù)組腦組織未見神經(jīng)細(xì)胞損傷,沒有出現(xiàn)明顯的病理改變。MCP-1陽性細(xì)胞可見于小膠質(zhì)細(xì)胞,神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞。腦梗死組病變側(cè)腦組織在6hMCP-1陽性細(xì)胞數(shù)開始增加,24h達(dá)到高峰,與假手術(shù)組比較,在6h、24h、48h、72h有顯著性差異,P<0.05;兩側(cè)腦組織陽性細(xì)胞數(shù)比較
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