TGF-β1-TAK1在房顫心肌纖維化中的表達(dá)及纈沙坦的影響.pdf

1、研究背景:心房顫動簡稱房顫,是臨床上最常見的心律失常。心房顫動發(fā)病機(jī)制的基礎(chǔ)及臨床研究發(fā)現(xiàn),房顫的發(fā)生和維持過程中心房組織發(fā)生了電重構(gòu)和結(jié)構(gòu)重構(gòu)。心房顫動的長期維持則與組織學(xué)結(jié)構(gòu)重構(gòu)密切相關(guān),組織學(xué)結(jié)構(gòu)重構(gòu)主要表現(xiàn)為①心肌超微結(jié)構(gòu)的改變;②心房擴(kuò)大;③心肌間質(zhì)纖維化。其中心肌纖維化在心房重構(gòu)過程中占有重要的地位,其作用機(jī)制與心房肌電傳導(dǎo)不均一、局部傳導(dǎo)阻滯或折返的形成有關(guān)。研究表明TGF-β1是重要的促纖維化細(xì)胞因子之一,其參與了房顫心

2、房纖維化的過程,但其作用機(jī)制尚不十分清楚,本研究探討TGF-β1促進(jìn)纖維化的部分機(jī)制,為房顫的治療提供新的方向。
　　 目的:1、探討房顫的發(fā)生過程中是否存在心房肌的纖維化。2、探討纈沙坦抑制心房纖維化的有效性。3、探討TGF-β1/TAK1是否介導(dǎo)了纈沙坦對心肌纖維化的抑制作用。
　　 方法:健康雄性新西蘭大白兔(2.5±0.5kg)40只隨機(jī)分成4組,每組各10只:假手術(shù)組(GroupS);快速起搏組(GroupP)

3、;快速起搏+纈沙坦組(10mg/kgperday)(GroupD1),快速起搏+胺碘酮組(10mg/kgperday)(GroupD2)。給予兔左心房心外膜電起搏,以900次/分鐘高頻不問斷起搏4周,建立房顫模型;分別于起搏前后及起搏后28天錄取心電圖,觀察房顫的發(fā)生情況。藥物干預(yù)組于起搏的同時(shí)予藥物灌胃4周,4周后取兔心房組織,觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu)變化(HE染色),比較左房重量指數(shù)及膠原蛋白的表達(dá)水平(Masson染色),免疫組化、Weste

4、n-blot檢測TGF-β1、TAK1蛋白表達(dá)水平,PCR檢測TGF-β1mRNA、TAK1mRNA的表達(dá)水平。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)為實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次的平均值,以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。用spss11.0統(tǒng)計(jì)軟件,以O(shè)ne-wayANOVA分析各組別之間的差異,各組間的比較采用SNK檢驗(yàn),相關(guān)分析采用Pearson直線相關(guān)。
　　 結(jié)果:1、起搏兔的左房重量、左房重量指數(shù)明顯高于GroupS,Masson染色顯示起搏兔的左心房心肌間質(zhì)膠原顯著增多,提

5、示左房纖維化,與GroupP比較,GroupD1的左房重量、左房重量指數(shù)顯著減少,Masson染色顯示GroupD1的左心房心肌間質(zhì)膠原顯著減少,提示纈沙坦抑制了左房纖維化,與GroupP比較,GroupD2的左房重量、左房重量指數(shù)未減少,Masson染色顯示GroupD2的左心房心肌間質(zhì)膠原未見顯著減少,提示胺碘酮未抑制左房纖維化。2、分別采用免疫組化、Westen-blot檢測TGF-β1、TAK1蛋白表達(dá)水平,PCR檢測TGF-β

6、1mRNA、TAK1mRNA的表達(dá)水平。起搏組的TGF-β1、TAK1的表達(dá)明顯高于GroupS。與GroupP比較,GroupD1的TGF-β1、TAK1的表達(dá)水平明顯降低,GroupD2的TGF-β1、TAK1的表達(dá)水平未降低。3、在起搏組中,代表心肌纖維化的心肌間質(zhì)膠原及LAWI與TGF-β1、TAK1的表達(dá)密切相關(guān)(P＜0.05),其中與TGF-β1呈正相關(guān)(R2=0.72,P＜0.05),與TAK1呈正相關(guān)(R2=0.762,