TGF-β-,1-及其受體在胰腺纖維化大鼠中表達的研究.pdf

1、目的；TGF-β1是一種多肽類細胞生長因子，能刺激間質細胞增生，抑制上皮類細胞生長，促進細胞外基質形成，抑制免疫功能，參與血管生成等。通過其Ⅰ型受體(TβRI)和Ⅱ型受體(TβRII)以及細胞內的Smad信號通道蛋白發(fā)揮作用。在肝、腎、肺等器官纖維化中，TGF-β1及其Ⅰ、Ⅱ型受體的表達均較正常組織明顯升高。TGF-β1是慢性胰腺炎胰腺纖維化形成過程中很關鍵的細胞因子，這一觀點已經被廣泛認可。但是，在此過程中，其Ⅰ、Ⅱ型受體的表達有何變

2、化國內外研究尚少。本研究利用雄性Wistar大鼠建立胰腺纖維化的動物模型，通過觀察TGF-β1及其受體在大鼠胰腺纖維化形成過程中的變化來推測它們在胰腺纖維化中的作用，從而進一步探討慢性胰腺炎的發(fā)病機制。 方法；健康雄性Wistar大鼠48只，體重220～240g，將其隨機分為2組：對照組和模型組，每組24只。然后對2組大鼠分別進行如下處理：模型組：每周2次腹腔內注射二乙基二硫代氨基甲酸鈉(DDC)750mg/kg；對照組：每周2

3、次腹腔內注射生理鹽水7.5ml/kg。從第一周開始，每周處死各組大鼠的4只，取胰腺組織和肝、腎組織。將一部分胰腺組織用10％福爾馬林溶液固定，石蠟包埋，HE染色，然后由病理科醫(yī)生顯微鏡下觀察，進行組織學觀察評分。胰腺組織中腺細胞萎縮、小葉內或小葉間纖維化以及炎癥細胞浸潤等病理改變的評分標準如下：0分：無上述病理改變；1分：上述損傷輕微且局限于小葉內(不超過50％)；2分：小葉內有較廣泛的上述損傷(超過50％)；3分：上述損傷廣泛的存在于

4、小葉間和小葉內，或有小葉結構破壞。低倍鏡下從每張切片中任選3個視野進行評分，3次分數(shù)之和即為該切片的組織學得分。另一部分胰腺組織保存在-80℃冰箱里，留待行RT-PCR檢測。將肝、腎組織用福爾馬林溶液固定、石蠟包埋、行HE染色，顯微鏡下觀察有無病理改變。實驗時間共6周。所有大鼠均喂以普通顆粒飼料，自由飲水。所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差((X)±SD)表示，采用SPSS11.0軟件處理。樣本間均數(shù)的比較采用t檢驗，變量間的關系采用直線相關分析

5、。P＜0.05表示有統(tǒng)計學意義。 結果；①前3周模型組大鼠較之對照組大鼠體重增長緩慢，但是兩組比較無統(tǒng)計學差異；從第4周開始模型組大鼠體重開始下降，與對照組相比體重有顯著差異；②從第二周開始，模型組大鼠胰腺組織開始出現(xiàn)纖維化，且隨時間延長纖維化程度加重，纖維化程度評分與對照組相比有顯著差異；③模型組大鼠胰腺組織表達TGF-β1、TβRI和TβRII在各個時期均高于對照組，兩者比較有顯著差異；④模型組大鼠胰腺組織所表達的TGF-β