人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化及體內(nèi)成骨潛力的初步研究.pdf

1、該研究首先用1.073g／ml Percoll密度梯度離心分離獲得MSCs,然后在含10﹪經(jīng)過篩選的胎牛血清的L-DMEM體系中培養(yǎng)、純化并獲得高純度的MSCs.應(yīng)用流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測細(xì)胞表面5種抗原分子,測定表明：所獲得的MSCs CD34陰性.CD45陰性、CD29陽性、CD44陽性、HLA-DR陰性,細(xì)胞純度達(dá)到99﹪以上.MSCs的抗原表型不是單一的,具有間質(zhì)細(xì)胞、上皮細(xì)胞等細(xì)胞的特征,但不表達(dá)造血干／祖細(xì)胞的標(biāo)志如CD34

2、和CD45,因此證明我們所分離的細(xì)胞是不同于HSCs的細(xì)胞群.MSCs在特定的條件下可定向分化為不同的間充質(zhì)組織細(xì)胞.進(jìn)一步研究MSCs在體內(nèi)的成骨作用,將MSCs作為種子細(xì)胞接種到多孔β-磷酸三鈣生物可降解支架材料內(nèi),形成兩者的復(fù)合體,復(fù)合8h后,將其移植到裸鼠背部皮下,在4w和14w時(shí)取材進(jìn)行組織化學(xué)染色.綜合上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果,采用密度梯度離心方法分離獲得的MSCs,在體外特定的誘導(dǎo)條件下能夠定向分化為成骨細(xì)胞.MSCs與β-磷酸三鈣復(fù)