柚皮甙誘導人骨髓間充質(zhì)干細胞向成骨細胞分化的實驗研究.pdf

1、分類號VDC博士學位論文飛尸“一99939‘密級——柚皮甙誘導人骨髓間充質(zhì)干細胞向成骨細胞分化的實驗研究ExperimentalStudyofNaringinInducedHumanBoneMa”owMesenchymalStemCellsDifferentiatinginto0steoblasts作者姓名學科專業(yè)學院(系、院)指導老師昌0指導老師張璇外科學(骨科)湘雅醫(yī)院鄧展生呂紅斌論文答辯醐冽!址／一一席奎中南大學2006年6月博士

2、學位論文中文摘要特異結構，細胞計數(shù)法檢測細胞貼壁率和分裂指數(shù)，CCK一8法檢測細胞增殖效應與繪制生長曲線。結果所分離、培養(yǎng)出的細胞形態(tài)呈長梭形，排列整齊；電鏡下觀察細胞核形狀多樣，以圓形和類圓形為主，僅含1個核仁，核質(zhì)比較大，有切跡，不規(guī)則，染色質(zhì)分布稀疏，細胞器稀少，未見纖維絲，表現(xiàn)為較幼稚的細胞，功能狀態(tài)處于相對靜息期；流式細胞術檢測結果顯示各組細胞CD34、CD45表達始終在35％以下；CD29、CD44和CDl05表達呈陽性，分

3、別為661％、773％和88O％；免疫細胞化學染色各組細胞CD44陽性，CD34陰性；第8代以前，兩組細胞增殖效應無統(tǒng)計學差異(PO05)，第8代開始，兩組細胞增殖效應有統(tǒng)計學差異(PO05)，B組代與代之間的細胞增殖效應也有統(tǒng)計學差異(PO05)；兩組第3、6代hBMSCs的貼壁速度與貼壁率無差異，接種后2hrl[]有64～66％的細胞貼壁，6hr貼壁率達89～90％，12hr貼壁率均97％，但B組第8代后的貼壁速度和貼壁率即出現(xiàn)明顯

4、降低，接種后2hr貼壁率只有33％，6hr為60％，12hr為84～88％；兩組第3、6代hBMSCs的分裂相無明顯差異，接種24hr出現(xiàn)，第2d明顯增多，第4d達峰值為70～72‰，以后逐漸下降，到第7d已無分裂；B組第8代后的分裂相即出現(xiàn)差異，分裂相接種24hr出現(xiàn)，第2d細胞明顯增多，第4d達峰值為60‰和50‰，以后逐漸下降，到第6d已無分裂。結論1成功分離、培養(yǎng)hBMSCs；2年齡和傳代對hBMSCs的活性有影響；第3代hBM