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1、目的：探討Nucleostemin（NS）在大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化中的機(jī)制及作用。
方法：取材選用的是4～6周齡雄性S-D大鼠的雙側(cè)脛骨和股骨骨髓基質(zhì)細(xì)胞，并進(jìn)行原代及傳代培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)至第3代設(shè)置對(duì)照組，分別將混合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞用普通培養(yǎng)液和礦化培養(yǎng)液培養(yǎng)。依次通過(guò)相差倒置顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)、MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖、堿性磷酸酶（AKP）和茜素紅鈣染色共同分析細(xì)胞的成骨活性。免疫組化SABC法及免疫熒光法檢
2、測(cè)NS在細(xì)胞中的表達(dá)情況，在普通培養(yǎng)基和成骨細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)基作用下比較NS分別的表達(dá)情況。
結(jié)果：在礦化培養(yǎng)基誘導(dǎo)下大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞其NS的表達(dá)較普通培養(yǎng)基培養(yǎng)下的表達(dá)明顯減弱，且呈時(shí)間依賴性衰減。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在礦化液作用下可誘導(dǎo)為團(tuán)狀分布的成骨細(xì)胞。成骨細(xì)胞的NS表達(dá)則為陰性。MTT檢測(cè)顯示礦化液培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)潛伏期長(zhǎng)，對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期較對(duì)照組延長(zhǎng)。
結(jié)論：①此方法可以獲得大量骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。②骨髓間充質(zhì)干
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