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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
利用慢性低氧伴有(不伴有)高脂飲食處理后的小鼠模型,探討慢性低氧與高脂飲食對(duì)小鼠的攝食行為、體重、空腹血糖的影響,并分析小鼠學(xué)習(xí)記憶和情緒變化及中樞胰島素受體的變化,同時(shí)觀察兩者對(duì)小鼠的行為和分子學(xué)改變有何異同及有無(wú)協(xié)同作用。
方法:
(1)實(shí)驗(yàn)分組:選用3月齡、普通清潔級(jí)C57BL/6J雄性小鼠28只,隨機(jī)分成4組:第1組為正常對(duì)照組NC(n=7);第2組為慢性低氧組CH(n=7);第
2、3組為高脂飲食組HF(n=7);第4組為慢性低氧伴高脂飲食組CH+HF(n=7)。
(2)模型制作:①慢性低氧模型的制作:采用常壓低氧氧艙,由進(jìn)氣孔向艙內(nèi)充高濃度氮?dú)夂脱鯕?,?shù)字測(cè)氧儀監(jiān)測(cè)艙中氧濃度。氧濃度9%±2%,CO2濃度低于1%,每天8h(8:30~16:30),共8周。每周7d。②高脂飲食模型的制作:含40%飽和脂肪酸的高能量飼料飼養(yǎng)8周,飼料主要配方包括繁殖熟料、豬油、蔗糖和粗蛋白,以脂肪和碳水化合物所占能量比
3、例最高。③慢性低氧伴高脂飲食模型:此組小鼠同時(shí)含有上述兩個(gè)干預(yù)因素。
(3)觀察指標(biāo):①小鼠攝食行為、體重、空腹血糖變化;②Morris水迷宮和八臂迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其學(xué)習(xí)記憶能力,采用開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、高架迷宮、強(qiáng)迫游泳和懸尾實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其情緒變化。③小鼠前額皮質(zhì)和海馬胰島素受體的表達(dá)量。
結(jié)果:
(1)一般觀察指標(biāo)①低氧可引起小鼠攝食量減少;高脂飲食則相反;低氧伴有高脂飲食小鼠的攝食和攝水量比低氧時(shí)都有所增加
4、。②低氧可引起小鼠體重下降;高脂飲食則相反。③高脂飲食、低氧伴高脂飲食時(shí)可引起小鼠FBG升高;低氧對(duì)小鼠FBG無(wú)明顯影響;低氧伴高脂飲食時(shí)比單純低氧時(shí)小鼠的FBG要高。
(2)行為學(xué)檢測(cè)指標(biāo)①學(xué)習(xí)記憶能力:低氧和高脂飲食都可引起小鼠工作記憶受損,都對(duì)空間參考記憶無(wú)明顯影響。低氧伴有高脂飲食時(shí)可引起小鼠參考記憶和工作記憶受損;低氧與高脂飲食對(duì)工作記憶損傷作用比單純低氧和高脂飲食的作用更強(qiáng),即兩者對(duì)小鼠工作記憶的損傷作用有協(xié)同
5、效應(yīng)。②情緒及探索行為:低氧伴有高脂飲食時(shí)可使小鼠出現(xiàn)抑郁情緒,慢性低氧和高脂飲食可引起小鼠出現(xiàn)焦慮抑郁情緒和探索行為增加,且低氧與高脂飲食對(duì)抑郁情緒的產(chǎn)生有協(xié)同效應(yīng)。
(3)胰島素受體:慢性低氧與高脂飲食均可引起小鼠前額皮質(zhì)、海馬CA1區(qū)、CA3區(qū)IR的表達(dá)量減少,且兩者對(duì)IR的的負(fù)性作用有協(xié)同效應(yīng);高脂飲食對(duì)前額皮質(zhì)區(qū)IR的負(fù)性作用比慢性低氧的作用更強(qiáng),但哪個(gè)因素對(duì)海馬CA1區(qū)和CA3區(qū)IR的作用更強(qiáng)并不確定;高脂飲食
6、、低氧伴有高脂飲食時(shí)小鼠海馬CA2區(qū)IR表達(dá)會(huì)減少,單純低氧不會(huì)引起CA2區(qū)IR表達(dá)減少。
結(jié)論:
(1)慢性低氧可引起小鼠攝食量減少,體重下降,工作記憶受損,出現(xiàn)焦慮抑郁情緒和探索行為增加,可引起小鼠前額皮質(zhì)、海馬CA1區(qū)、CA3區(qū)IR的表達(dá)量減少。這種工作記憶損傷和情緒障礙可能與減少前額皮質(zhì)、海馬CA1區(qū)和CA3區(qū)IR的表達(dá)量減少有關(guān)。
(2)高脂飲食可引起小鼠攝食量增加,體重增加,糖代謝紊
7、亂,損傷工作記憶,并出現(xiàn)焦慮抑郁情緒和探索行為增加,還可引起小鼠前額皮質(zhì)和海馬各CA區(qū)IR的表達(dá)量減少,這種工作記憶損傷和情緒障礙可能是通過(guò)減少前額皮質(zhì)、海馬各CA區(qū)IR的表達(dá)量來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
(3)慢性低氧伴高脂飲食時(shí)可引起小鼠糖代謝紊亂,參考記憶和工作記憶都受損,并出現(xiàn)抑郁情緒,且兩者對(duì)小鼠工作記憶損傷作用和抑郁情緒的產(chǎn)生有協(xié)同效應(yīng),這種小鼠前額皮質(zhì)、海馬各CA區(qū)IR的表達(dá)量都減少;各種記憶損傷和抑郁情緒的出現(xiàn)可能是通過(guò)下
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