氫分子對高脂飲食C57BL-6小鼠肝臟氧化應激的影響及其分子機制研究.pdf

1、研究背景:
　　近年來，與肥胖相關(guān)的疾病如高血壓、2型糖尿病、動脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)、脂肪肝、膽石癥等的發(fā)病率逐漸升高，且這類疾病均被證實與氧化應激密切相關(guān)，氧物自由基過多是誘發(fā)上述疾病的共同病理生理學基礎，正因為如此，清除自由基能夠起到預防或治療此類氧化損傷相關(guān)疾病的作用。實驗證明，氫分子作為一種新型抗氧化劑，可以選擇性的清除氧自由基中具有強毒性的羥基自由基和亞硝陰離子，以保護細胞免受氧化應激的損傷

2、，且自身相對穩(wěn)定，不影響細胞內(nèi)正常的氧化還原反應信號，使之不會產(chǎn)生干擾細胞功能等副作用。目前氫分子在醫(yī)學領域的應用越來越廣泛，研究涉及器官缺血-再灌注創(chuàng)傷、動脈硬化、糖尿病、器官炎癥、老年性癡呆等多種疾病，以往的實驗均以證明氫分子抗氧化為基礎，且同時也說明了氫分子具有抗氧化以及相關(guān)的抗炎、抗細胞凋亡，調(diào)節(jié)脂代謝等多種作用，秦樹存團隊的實驗證明，氫分子能夠改善高脂飲食小鼠脂代謝紊亂，顯著降低了小鼠血脂的水平。
　　氫氣具有制備容易、

3、價格低廉、作用迅速、操作方便、滲透性強等諸多優(yōu)點，使其能夠廣泛的應用于諸多領域。到目前為止，關(guān)于氫分子的實驗大多以氧化應激為重點，來分析氫分子的治療作用，但關(guān)于其具體的分子機制上仍值得深入研究。關(guān)于氫分子抗氧化，降脂，抗炎，抗凋亡等多種作用之間是否存在相關(guān)性，氫氣對人體是否有完全沒有任何副作用等目前仍有待進一步的實驗證實。
　　目的:
　　本研究通過對小鼠體重，血脂分析研究氫分子對糖脂代謝的影響;通過對肝臟組織炎癥因子(In

4、terleukin-6，8，10，IL-6，8，10)，腫瘤壞死因子(Tumor necrosis factor-α，TNF-α)的分析研究氫分子對炎癥反應的影響;通過對氧化應激指標丙二醛(Malondialdehyde，MDA)，(superoxide dismutase，SOD)的測定，以及肝臟組織HE染色來探究氫分子對氧化應激反應的直接/間接作用。以此說明氫分子對高脂飲食C57BL/6小鼠的肝臟的氧化應激的影響機制。
　　方

5、法:
　　給予6周齡C57BL/6小鼠50只，隨機分為4組，分別腹腔注射不同劑量的氫氣飽和生理鹽水或普通生理鹽水8周。應用酶比色法檢測血漿中總膽固醇(Total Cholesterol，TC)、甘油三酯(Triglyceride，TG)、高密度脂蛋白膽固醇(High density lipoprotein cholesterol，HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(Low density lipoprotein cholestero

6、l，LDL-C)的含量，以說明氫分子對血脂水平的影響;通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked im uno-sorbentassay, ELISA)測定肝臟中MDA以及SOD的含量，以用來評估氧化應激的水平;同時測定肝臟組織IL-6，8，10，以及TNF-α，反應肝臟的炎癥水平;通過對肝組織進行HE染色，說明氫分子對肝細胞脂肪積累的影響。
　　結(jié)果:
　　1.與生理鹽水組對比，富氫水組的小鼠體重增長明顯減緩，高脂飲

7、食組和普通飲食組中，富氫水組相較對照組增長率分別下降了44.02％和58.43％，差距具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　2.普通飲食組和高脂飲食組中，富氫水組相較于對照組HDL-C分別上升了48.73％和20.13％，差距具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　3.普通飲食組和高脂飲食組中，富氫水組相較于對照組LDL-C分別下降了10.66％和17.03％; TC分別下降了27.51％和45.19％; TG分別下降了12.

8、44％和15.31％，且差距均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　4.普通飲食組和高脂飲食組中，富氫水組相較于對照組MDA分別下降了36.82％和14.48％，差距具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);普通飲食組SOD上升4.97％，差距無統(tǒng)計學意義，但顯示有上升趨勢;高脂飲食組中上升了95.21％，差距具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　5.普通飲食組和高脂飲食組中，富氫水組相較于對照組IL-6分別下降了35.22％和23.

9、61％;IL-8分別下降了34.50％和38.57％; IL-10分別下降了28.03％和26.80％，TNF-α分別下降了41.97％和20.24％，且差距均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　6.與生理鹽水組對比，富氫水組肝小葉及干細胞結(jié)構(gòu)更完整，且脂肪空泡面積減少，高脂飲食組和普通飲食組中，富氫水組相較對照組脂肪空泡面積分別下降了83.33％和85.71％，差距具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　結(jié)論: