氫分子對高脂飲食C57BL-6小鼠肝臟氧化應(yīng)激的影響及其分子機(jī)制研究.pdf

1、研究背景:
　　近年來，與肥胖相關(guān)的疾病如高血壓、2型糖尿病、動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)、脂肪肝、膽石癥等的發(fā)病率逐漸升高，且這類疾病均被證實(shí)與氧化應(yīng)激密切相關(guān)，氧物自由基過多是誘發(fā)上述疾病的共同病理生理學(xué)基礎(chǔ)，正因?yàn)槿绱?，清除自由基能夠起到預(yù)防或治療此類氧化損傷相關(guān)疾病的作用。實(shí)驗(yàn)證明，氫分子作為一種新型抗氧化劑，可以選擇性的清除氧自由基中具有強(qiáng)毒性的羥基自由基和亞硝陰離子，以保護(hù)細(xì)胞免受氧化應(yīng)激的損傷

2、，且自身相對穩(wěn)定，不影響細(xì)胞內(nèi)正常的氧化還原反應(yīng)信號，使之不會產(chǎn)生干擾細(xì)胞功能等副作用。目前氫分子在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用越來越廣泛，研究涉及器官缺血-再灌注創(chuàng)傷、動(dòng)脈硬化、糖尿病、器官炎癥、老年性癡呆等多種疾病，以往的實(shí)驗(yàn)均以證明氫分子抗氧化為基礎(chǔ)，且同時(shí)也說明了氫分子具有抗氧化以及相關(guān)的抗炎、抗細(xì)胞凋亡，調(diào)節(jié)脂代謝等多種作用，秦樹存團(tuán)隊(duì)的實(shí)驗(yàn)證明，氫分子能夠改善高脂飲食小鼠脂代謝紊亂，顯著降低了小鼠血脂的水平。
　　氫氣具有制備容易、

3、價(jià)格低廉、作用迅速、操作方便、滲透性強(qiáng)等諸多優(yōu)點(diǎn)，使其能夠廣泛的應(yīng)用于諸多領(lǐng)域。到目前為止，關(guān)于氫分子的實(shí)驗(yàn)大多以氧化應(yīng)激為重點(diǎn)，來分析氫分子的治療作用，但關(guān)于其具體的分子機(jī)制上仍值得深入研究。關(guān)于氫分子抗氧化，降脂，抗炎，抗凋亡等多種作用之間是否存在相關(guān)性，氫氣對人體是否有完全沒有任何副作用等目前仍有待進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)證實(shí)。
　　目的:
　　本研究通過對小鼠體重，血脂分析研究氫分子對糖脂代謝的影響;通過對肝臟組織炎癥因子(In

4、terleukin-6，8，10，IL-6，8，10)，腫瘤壞死因子(Tumor necrosis factor-α，TNF-α)的分析研究氫分子對炎癥反應(yīng)的影響;通過對氧化應(yīng)激指標(biāo)丙二醛(Malondialdehyde，MDA)，(superoxide dismutase，SOD)的測定，以及肝臟組織HE染色來探究氫分子對氧化應(yīng)激反應(yīng)的直接/間接作用。以此說明氫分子對高脂飲食C57BL/6小鼠的肝臟的氧化應(yīng)激的影響機(jī)制。
　　方

5、法:
　　給予6周齡C57BL/6小鼠50只，隨機(jī)分為4組，分別腹腔注射不同劑量的氫氣飽和生理鹽水或普通生理鹽水8周。應(yīng)用酶比色法檢測血漿中總膽固醇(Total Cholesterol，TC)、甘油三酯(Triglyceride，TG)、高密度脂蛋白膽固醇(High density lipoprotein cholesterol，HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(Low density lipoprotein cholestero

6、l，LDL-C)的含量，以說明氫分子對血脂水平的影響;通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linked im uno-sorbentassay, ELISA)測定肝臟中MDA以及SOD的含量，以用來評估氧化應(yīng)激的水平;同時(shí)測定肝臟組織IL-6，8，10，以及TNF-α，反應(yīng)肝臟的炎癥水平;通過對肝組織進(jìn)行HE染色，說明氫分子對肝細(xì)胞脂肪積累的影響。
　　結(jié)果:
　　1.與生理鹽水組對比，富氫水組的小鼠體重增長明顯減緩，高脂飲

7、食組和普通飲食組中，富氫水組相較對照組增長率分別下降了44.02％和58.43％，差距具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　2.普通飲食組和高脂飲食組中，富氫水組相較于對照組HDL-C分別上升了48.73％和20.13％，差距具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　3.普通飲食組和高脂飲食組中，富氫水組相較于對照組LDL-C分別下降了10.66％和17.03％; TC分別下降了27.51％和45.19％; TG分別下降了12.

8、44％和15.31％，且差距均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　4.普通飲食組和高脂飲食組中，富氫水組相較于對照組MDA分別下降了36.82％和14.48％，差距具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);普通飲食組SOD上升4.97％，差距無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但顯示有上升趨勢;高脂飲食組中上升了95.21％，差距具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　5.普通飲食組和高脂飲食組中，富氫水組相較于對照組IL-6分別下降了35.22％和23.

9、61％;IL-8分別下降了34.50％和38.57％; IL-10分別下降了28.03％和26.80％，TNF-α分別下降了41.97％和20.24％，且差距均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　6.與生理鹽水組對比，富氫水組肝小葉及干細(xì)胞結(jié)構(gòu)更完整，且脂肪空泡面積減少，高脂飲食組和普通飲食組中，富氫水組相較對照組脂肪空泡面積分別下降了83.33％和85.71％，差距具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　結(jié)論: