引起呼吸機相關(guān)性肺炎銅綠假單胞菌的耐藥機制研究.pdf

1、目的：1、研究高齡患者呼吸機相關(guān)性肺炎的病原菌分布及耐藥情況。2、探討引起呼吸機相關(guān)性肺炎的銅綠假單胞菌耐藥機制。3、對多藥耐藥銅綠假單胞菌進行體外聯(lián)合藥敏試驗，為臨床合理用藥提供依據(jù)。
　　方法：
　　1、收集2007年1月～2011年6月診斷為VAP的高齡患者123例，研究其病原菌分布及耐藥情況。
　　2、將兩周之內(nèi)，同一患者且對某一類抗菌藥物藥敏有變化的兩株銅綠假單胞菌配為一對，其中碳青霉烯類20對，喹諾酮類22

2、對，氨基糖苷類15對，多粘菌素B10對。收集來自30個高齡VAP患者的PA122株。
　　3、瓊脂稀釋法檢測PA對14種抗生素的MIC、外排泵表型。PFGE法檢測基因同源性。雙紙片協(xié)同法檢測金屬酶表型。PCR法檢測耐藥基因。結(jié)晶紫染色法檢測細菌生物被膜形成能力。掃描電鏡觀察生物被膜。棋盤法設計，瓊脂稀釋法行體外聯(lián)合藥敏。
　　結(jié)果：
　　1、123例高齡老年VAP患者共檢出細菌409株，其中革蘭氏陰性菌355株，革蘭氏

3、陽性菌54株，革蘭陰性菌中銅綠假單胞菌24.44％、鮑曼不動桿菌17.11％、嗜麥芽窄食單胞14.67％、洋蔥伯克霍爾德菌7.58％；革蘭陽性菌中以金黃色葡萄球菌9.05％為主。銅綠假單胞菌對常用抗菌藥物的耐藥性較高。
　　2、所收集的配對PA菌株共來自30個患者，其中70％的患者痰標本分離的配對菌株經(jīng)PFGE證明為同一基因來源，30％的患者痰標本分離的配對菌株經(jīng)PFGE證明為不同基因來源。
　　3、4個患者共8株菌擴增出O

4、XA-1基因，3個患者共6株菌擴增出OXA-10基因，僅一個患者1株菌擴增出GES基因，13個患者共33株菌擴增出OprD2基因，余菌株為OprD2基因缺失或部分缺失菌株。未擴增出KPC、GIM、OXA-2、VIM及IMP耐藥基因。同一患者來源且經(jīng)PFGE證明為同一基因來源的菌株中，PCR法檢測其耐藥基因型如OXA-1、OXA-10、GES、OprD2并不完全一致。僅有一個患者分離的共4株菌金屬酶表型陽性。5個患者共9株菌外排泵表型陽性