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1、第一部分:
目的:探討凍干膠聯(lián)羊膜在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物兔眼抗青光眼手術(shù)中的抗纖維化作用。
方法:選擇日本大白兔24只,隨機(jī)分為3組:實(shí)驗(yàn)組濾過(guò)手術(shù)聯(lián)合凍干膠聯(lián)羊膜移植術(shù)組,對(duì)照組濾過(guò)手術(shù)聯(lián)合膠聯(lián)自然羊膜組,空白組單純?yōu)V過(guò)手術(shù)組。分別與手術(shù)后7天,14天,21天,30天進(jìn)行臨床觀察,HE 染色,massion 染色,α-SMA 免疫組化進(jìn)行組織病理學(xué)觀查。應(yīng)用實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)測(cè)其濾過(guò)區(qū)域的結(jié)締
2、組織生長(zhǎng)因子(CTGF)mRNA的表達(dá)水平。
結(jié)果:分別與手術(shù)后7天,14天,21天,30天進(jìn)行臨床觀察,結(jié)膜充血及眼壓有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;組織病理學(xué)分析(HE 染色,massion染色,α-SMA 免疫組化)進(jìn)一步證實(shí),濾過(guò)手術(shù)聯(lián)合凍干膠聯(lián)羊膜移植術(shù)組傷口愈合良好,有效減少瘢痕形成,有利于長(zhǎng)期保證術(shù)后效果。定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)測(cè)其濾過(guò)區(qū)域的結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)mRNA的表達(dá)水平,各組在術(shù)后14天達(dá)到
3、高峰,在實(shí)驗(yàn)的各個(gè)時(shí)間段CTGFmRNA的表達(dá):實(shí)驗(yàn)組<對(duì)照組<空白組。
結(jié)論:在實(shí)驗(yàn)中,凍干膠聯(lián)羊膜延長(zhǎng)了濾過(guò)泡生存時(shí)間,減少了結(jié)膜充血程度,抑制了組織纖維化,在手術(shù)后一定程度降低了眼壓。這種新材料可能常規(guī)用在青光眼濾過(guò)術(shù)中。
第二部分:
目的:探討自制凍干膠聯(lián)羊膜做為緩釋藥膜應(yīng)用于兔眼濾過(guò)術(shù)后結(jié)膜瓣下,起到抗纖維化作用,延長(zhǎng)濾過(guò)泡生存時(shí)間,降低術(shù)后眼內(nèi)壓(IOP),促進(jìn)濾過(guò)術(shù)后傷口正常愈合。
4、
方法:選擇日本大白兔24只,隨機(jī)分為3組:實(shí)驗(yàn)組濾過(guò)手術(shù)聯(lián)合結(jié)膜瓣下放置5-fu 膠聯(lián)凍干羊膜緩釋藥膜,對(duì)照組濾過(guò)手術(shù)聯(lián)合結(jié)膜瓣下應(yīng)用5-fu組,空白組單純?yōu)V過(guò)手術(shù)組。分別與手術(shù)后7天,14天,21天,30天進(jìn)行臨床觀察,HE染色,massion 染色,α-SMA 免疫組化進(jìn)行組織病理學(xué)觀查。高效液相(HPLC)色譜儀檢測(cè)膠聯(lián)羊膜5-Fu 緩釋藥膜控釋系統(tǒng)的兔眼內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)情況。
結(jié)果:分別與手術(shù)后7天,1
5、4天,21天,30天進(jìn)行臨床觀察,結(jié)膜充血及眼壓有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;組織病理學(xué)分析(HE 染色,massion 染色,α-SMA 免疫組化)進(jìn)一步證實(shí),濾過(guò)手術(shù)聯(lián)合凍干膠聯(lián)羊膜緩釋藥膜移植術(shù)組傷口愈合良好,有效減少瘢痕形成,有利于長(zhǎng)期保證術(shù)后效果。HPLC 檢測(cè)術(shù)后3天實(shí)驗(yàn)組組5-Fu 釋放量大于B組5-Fu 釋放量。5-FU能從緩釋系統(tǒng)中緩慢釋放,體內(nèi)外釋藥平穩(wěn)、高效,無(wú)突釋現(xiàn)象。
結(jié)論:在實(shí)驗(yàn)中,凍干膠聯(lián)聯(lián)羊膜緩釋藥膜延長(zhǎng)了
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