寶靈膏對(duì)蒙古沙鼠腦缺血再灌注損傷的影響.pdf

1、目的： 觀察BP對(duì)蒙古沙鼠CIRI腦組織SOD、MDA、BCL-2表達(dá)及腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)的影響，在此基礎(chǔ)上選用BPH、BPM、BPL三個(gè)劑量組進(jìn)行對(duì)照治療比較，初步探討其療效及是否存在劑量依賴(lài)性。 方法： 120只8周齡雄性蒙古沙鼠在環(huán)境適應(yīng)性正常喂養(yǎng)一周后隨機(jī)分為S組、M組、BPH、BPM、BPL5組，每組24只。于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始第一天S、M組分別給予等量的生理鹽水灌胃，BPH、BPM、BPL組分別給予300mg/k

2、g/d、200mg/kg/d、100mg/kg/d灌胃，各組每天灌胃一次，兩周后手術(shù)造模。造模方法：采用先短暫夾閉沙鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈后松夾的方法制造沙鼠CIRI模型；造模具體步驟：M、BPH、BPM、BPL組均采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈夾閉10min，后松夾縫合術(shù)處，S組僅分離沙鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈而不夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈。 造模成功后繼續(xù)重復(fù)手術(shù)前的給藥方式，分別于給藥后24h、72h、120h各時(shí)間點(diǎn)各組沙鼠經(jīng)過(guò)在體灌注(4只)和非在體灌注(4只

3、)二種方式后斷頭處死，取其中4只非在體灌注的沙鼠新鮮腦組織，通過(guò)TTC染色測(cè)定腦梗死體積、紫外分光光度儀測(cè)定SOD、MDA的含量。取另外4只經(jīng)過(guò)在體灌注的沙鼠腦組織，分別通過(guò)DAB染色(化學(xué)方法)測(cè)定抑凋亡基因Bcl-2的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(免疫熒光法)檢測(cè)腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)。 結(jié)果： 1、實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明BP能降低CIRI后腦梗死體積，BPH組作用顯著，與M組比較(P＜0.01)；BPL與M組比較

4、明顯降低腦梗死體積(P＜0.05)。 2、對(duì)SOD的作用：BP治療組SOD的含量高于模型組，其中BPH、BPM組較M組增高明顯(P＜0.01)，BPL組與M組比較亦有所增高(P＜0.05)，說(shuō)明寶靈膏有增強(qiáng)CIRI沙鼠腦組織中SOD的含量、對(duì)抗氧自由基對(duì)腦組織損傷的作用。 3、對(duì)MDA的作用：BPH、BPM組MDA含量與M組比較顯著降低(P＜0.01)，其與S組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，BPL組與M組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.0

5、5)，表明BP能使CIRI沙鼠腦組織中MDA的含量恢復(fù)到術(shù)前生理水平。 4、BP對(duì)CIRI沙鼠腦組織抑凋亡基因Bcl-2表達(dá)的影響：實(shí)驗(yàn)表明BPH、BPM、BPL組皆能提高CIRI沙鼠腦組織抑凋亡基因的表達(dá)，BPH、BPM組Bcl-2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較模型組表達(dá)明顯增多(P＜0.01)，BPL組Bcl-2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較M組表達(dá)增多(P＜0.05)，但BPL組較BPH、BPM組相比較隨著CIRI時(shí)間的延長(zhǎng)腦組織Bcl-2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增加的趨

6、勢(shì)有所放緩。 5、BP對(duì)腦組織神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響(一步TUNEL法)：BPH、BPM組凋亡陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較M組顯著減少(p＜0.01)，BPL組凋亡陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較M組減少(p＜0.05)，實(shí)驗(yàn)還顯示雖然BPH、BPM、BPL組在降低CIRI后腦組織神經(jīng)元細(xì)胞凋亡數(shù)量上差別明顯，但隨著CIRI后時(shí)間的延長(zhǎng)其降低腦組織神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的趨勢(shì)皆為增強(qiáng)。 結(jié)論： BP對(duì)CIRI模型沙鼠有明顯的治療作用，能減少腦梗死體積，增強(qiáng)腦組

7、織SOD的含量，降低MDA的含量，從而起到很好的對(duì)抗氧自由基損傷的作用；同時(shí)BP能促進(jìn)CIRI沙鼠腦組織Bcl-2的表達(dá)，降低腦組織神經(jīng)元細(xì)胞凋亡；并且BP對(duì)SOD、MDA、Bcl-2、腦細(xì)胞凋亡的作用有明顯的劑量依賴(lài)型性。在實(shí)驗(yàn)所設(shè)計(jì)的時(shí)間窗內(nèi)，BP在增加對(duì)抗氧自由基損傷SOD含量、降低脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA方面有減緩的趨勢(shì)，但隨著CIRI后時(shí)間的延長(zhǎng)其促進(jìn)Bcl-2的表達(dá)、降低腦組織神經(jīng)元細(xì)胞凋亡及腦梗死體積的趨勢(shì)皆為增強(qiáng)，這種表面的