α酮酸加低蛋白飲食延緩KKAy小鼠糖尿病腎病進(jìn)展的機(jī)制：抗氧化應(yīng)激的作用.pdf

1、隨著人口老齡化和生活方式改變，2型糖尿病(T2DM)的發(fā)病率逐年升高，預(yù)計(jì)到2030年全世界T2DM的患病人數(shù)將達(dá)到3億，其中25％～40％的患者出現(xiàn)DN[1]。DN是糖尿病最嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥之一，為糖尿病患者的主要死因。糖尿病進(jìn)展至終末期糖尿病腎病一般要經(jīng)過(guò)高濾過(guò)、微量白蛋白尿、大量蛋白尿和腎衰竭幾個(gè)階段。一旦患者出現(xiàn)持續(xù)大量蛋白尿，則病情不可逆轉(zhuǎn)，直至ESRD。因此，早發(fā)現(xiàn)，早治療糖尿病和糖尿病腎病十分重要。
　　 2型糖

2、尿病和糖尿病腎病的治療包括生活方式改變、控制高血糖、降低高血壓、降低高血脂、降低蛋白尿及防治心血管并發(fā)癥等措施。在降蛋白尿治療中，限制蛋白質(zhì)攝入及阻斷腎素-血管緊張素系統(tǒng)是主要治療方法。
　　 限制蛋白攝入，能夠減少DN患者蛋白尿的排泄，減輕大量蛋白尿?qū)δI組織的進(jìn)一步損傷。但是目前的研究，對(duì)于LPD能否延緩CKD進(jìn)展，降低患者死亡率尚存在爭(zhēng)議。本課題利用KKAy小鼠這一糖尿病腎臟早期的動(dòng)物模型，給予不同比例的蛋白飲食，通過(guò)檢測(cè)小

3、鼠腎臟病變進(jìn)展情況，觀察LPD加α酮酸飲食對(duì)糖尿病腎病進(jìn)展的影響。
　　 本研究的目的在于：①明確低蛋白加α酮酸飲食是否能夠減緩T2DM小鼠的腎臟病變進(jìn)展。②探討低蛋白加α酮酸飲食延緩DN進(jìn)展的可能機(jī)制：是否影響腎組織氧化應(yīng)激水平，從而為糖尿病腎病的飲食治療提供理論依據(jù)。
　　 本研究由兩部分組成。
　　 一、低蛋白加α酮酸飲食對(duì)2型糖尿病KKAy小鼠的腎臟保護(hù)作用
　　 選取雄性8周齡KK-Ay小鼠作為

4、2型糖尿病動(dòng)物模型，隨機(jī)分為3組分別為正常蛋白飲食組(NPD)、低蛋白飲食組(LPD)、低蛋白+酮酸組(LPD+KA)。對(duì)照組同周齡具有相同遺傳背景的C57BL/6J小鼠(Control)。上述各組小鼠給予正常蛋白飲食適應(yīng)性喂養(yǎng)4周，于第12周開始給予相應(yīng)的飲食。分別于12、16、20、24周齡收集血、尿標(biāo)本。血清用于檢測(cè)空腹血糖、血清白蛋白。24小時(shí)尿液用于尿蛋白/尿肌酐比值的檢測(cè)。24周齡處死小鼠留取腎組織，行相關(guān)檢查。
　　

5、 結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比較，24周齡NPD組小鼠出現(xiàn)明顯的糖尿病腎病的病理改變。24周齡NPD組出現(xiàn)明顯的腎小球系膜基質(zhì)增加，同時(shí)腎小球基底膜顯著增厚。LPD和LPD+KA組病變輕于NPD組。LPD+KA組小鼠病理改變最輕，治療效果優(yōu)于LPD組。LPD組小鼠出現(xiàn)體重輕、血清白蛋白水平低，同時(shí)尿蛋白與尿肌酐比值升高，與LPD+KA組存在顯著差異。
　　 二、低蛋白加α酮酸飲食可以通過(guò)減輕腎組織氧化應(yīng)激水平延緩DN進(jìn)展。
　

6、　 將24周齡各組小鼠腎組織行組織勻漿檢測(cè)SOD、MDA，提取總蛋白行Oxybolt檢測(cè)蛋白氧化水平，行Western-blot檢測(cè)硝基化酪氨酸。結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，KKAy三組小鼠氧化應(yīng)激(MDA、硝基化酪氨酸、Oxybolt)水平明顯升高，SOD水平顯著下降((P＜0.05)，LPD+KA組相關(guān)指標(biāo)顯著優(yōu)于NPD組和LPD組。
　　 本研究發(fā)現(xiàn)低蛋白加α酮酸飲食與單純低蛋白飲食比較，能夠延緩2型糖尿病小鼠腎損害進(jìn)展，其