氧化應(yīng)激在糖尿病創(chuàng)面愈合中的作用及其產(chǎn)生機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、[目的]探討氧化應(yīng)激在糖尿病創(chuàng)面愈合中的作用及其可能的產(chǎn)生機(jī)制。 [方法]選用STZ誘導(dǎo)的速發(fā)型DM大鼠模型和糖尿病患者皮膚組織標(biāo)本，通過生化技術(shù)、免疫組化等手段檢測(cè)皮膚組織中的糖含量、AGEs的表達(dá)、丙二醛(MDA)含量以及糖尿病大鼠血糖、血漿中糖化血清蛋白(GSP)含量、過氧化氫(H<,2>O<,2>)含量、丙二醛(MDA)含量和谷光甘肽(GSH)含量；以H<,2>O<,2>為氧化應(yīng)激模型，體外觀察其對(duì)SD大鼠真皮成纖維細(xì)胞

2、生物學(xué)行為的影響及其作用機(jī)制；建立不同濃度AGEs蛋白體外培養(yǎng)體系，檢測(cè)AGEs、高糖作用外周血中性粒細(xì)胞產(chǎn)生ROS的變化，用不同濃度的葡糖糖和(或)人血清白蛋白體外孵育觀察糖的自身氧化產(chǎn)生H<,2>O<,2>的變化。 [結(jié)果]創(chuàng)傷前糖尿病大鼠皮膚已存在著一系列的病理生理改變，包括皮膚糖含量升高，AGEs蓄積；真皮變薄、膠原排列紊亂，有部分膠原可見變性、斷裂，膠原變性區(qū)域可見明顯的炎性細(xì)胞局灶性浸潤(rùn)的現(xiàn)象。皮膚中MDA與正常對(duì)照

3、組比較明顯增高；燙傷前后糖尿病組血漿中糖化血清蛋白(GSP)含量較對(duì)照組明顯升高(P<0.01)，血漿過氧化氫(H<,2>O<,2>)含量較對(duì)照組明顯升高(P<0.01)，血漿丙二醛(MDA)含量較對(duì)照組明顯升高(P<0.05)，血漿GSH含量較對(duì)照組下降(P<0.05)；體外AGEs干預(yù)中性粒細(xì)胞OD值較正常對(duì)照組明顯升高(P<0.05)，隨AGEs濃度的升高，中性粒細(xì)胞產(chǎn)生活性氧的能力明顯增強(qiáng)(P<0.05)。高糖干預(yù)中性粒細(xì)胞活性

4、氧的產(chǎn)生較對(duì)照組明顯增多(P<0.05)，不同濃度的葡糖糖和(或)人血清白蛋白體外孵育均能不同程度地產(chǎn)生H<,2>O<,2>(P<0.01)；隨著H202體濃度的升高，成纖維細(xì)胞活力明顯下降，與氧化應(yīng)激在糖尿病大鼠創(chuàng)面愈合中的作用及其產(chǎn)生機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究對(duì)照組相比，20 μ mol/L H<,2>O<,2>干預(yù)組細(xì)胞凋亡無明顯變化(P>0.05)，100mol/LH<,2>O<,2>干預(yù)組細(xì)胞凋亡明顯升高(P<0.01)，20μmol/L

5、和100 μ mol/L H<,2>O<,2>干預(yù)組細(xì)胞活性氧的產(chǎn)生明顯升高(分別為P<0.05，p<0.01)，20μmol/L H<,2>O<,2>預(yù)組細(xì)胞MDA含量無明顯變化(P>0.05)，100μmol/L H<,2>O<,2>干預(yù)組細(xì)胞MDA含量明顯升高(P<0.01)。 [結(jié)論]糖尿病皮膚在損傷前就存在組織損傷，局部皮膚組織糖含量增高、AGEs的蓄積及其對(duì)于中性粒細(xì)胞的作用及糖自身氧化產(chǎn)生了活性氧，并導(dǎo)致燙傷前后皮