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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
探討p27基因轉(zhuǎn)染對(duì)血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)增殖的影響及由SM22alpha啟動(dòng)子介導(dǎo)的特異性效果。
方法:
提取SM22alpha啟動(dòng)子,構(gòu)建攜帶p27基因的重組慢病毒,并感染原代培養(yǎng)細(xì)胞,BrdU摻入法及MTT檢測(cè)分析外源性p27在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá),以及對(duì)細(xì)胞增殖的影響。
結(jié)果:
獲得含SM22alpha 啟動(dòng)子、p27 cDNA的重組慢病毒,滴度為2×1
2、06 TU/mL。P27表達(dá)陽(yáng)性率隨Lenti-SM22alpha-p27感染效率提高而不斷增加。在合適的感染效率下,Lenti-SM22alpha-p27可以顯著抑制VSMCs增殖(P<0.05);并使得BrdU陽(yáng)性細(xì)胞率顯著降低(P<0.05)。內(nèi)皮細(xì)胞感染Lenti-SM22alpha-p27不出現(xiàn)p27過(guò)表達(dá)及細(xì)胞增殖抑制。
結(jié)論:
SM22alpha啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)p27基因在VSMCs中的特異性表達(dá),可
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