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1、該課題利用反義核酸技術(shù),通過RT-PCR、Western Blotting半定量和原位雜交、免疫組化等定性方法,對bFGF與VSMC增殖之間的關(guān)系進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究.第一章:大鼠血管平滑肌細(xì)胞原代培養(yǎng)的建立及鑒定;第二章:VSMC中bFGF及其受體FGFR-1的基因表達(dá);第三章:bFGF反義寡核苷酸體外抑制VSMC增殖的研究;結(jié)論:1.大鼠血管平滑肌細(xì)胞表達(dá)bFGF和其主要受體FGFR-1,說明了bFGF自分泌環(huán)在大鼠VSMC增殖中的
2、作用.2.bFGF反義ODN轉(zhuǎn)染VSMC,bFGF mRNA表達(dá)和蛋白表達(dá)明顯減少,而對照組正義、隨機、脂質(zhì)體和空白對照的bFGF mRNA表達(dá)和蛋白表達(dá)無改變,表明bFGF反義ODN對bFGF基因表達(dá)有明顯的、特異性的抑制作用.3.bFGF反義ODN可明顯抑制大鼠VSMC的增殖,這種抑制作用有劑量依賴性和時效性,在1~3天作用明顯,隨后逐漸降低,第5天接近對照組水平.4.正義、隨機ODN在高濃度下,轉(zhuǎn)染早期也有短暫地抑制細(xì)胞增殖作用,
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