沙鼠前腦缺血再灌注后腦組織HSP20和iNOS的表達(dá)及HSP20動(dòng)脈血清濃度的研究.pdf

1、目的： 探討在沙鼠短暫性前腦缺血再灌注模型中，HSP2O與iNOS在腦組織中表達(dá)的相關(guān)性及前者在動(dòng)脈血清中的濃度變化，評(píng)估HSP20的神經(jīng)保護(hù)作用及其臨床應(yīng)用前景。 方法： 通過夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈10分鐘后再通的方法建立沙鼠前腦缺血再灌注模型：45只健康雄性蒙古沙鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組(n=5)、假手術(shù)組(SO)(n=20)和缺血再灌注組(I/R)(n=20)，后兩者分別分為6小時(shí)、1天、3天和7天四個(gè)亞組，每組5只

2、，分別在缺血再灌注或假手術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)收集動(dòng)脈血血清后分批處死動(dòng)物，快速取腦組織制作標(biāo)本，采用HE染色觀察海馬CAl區(qū)病理改變；采用免疫組織化學(xué)染色方法分別檢測(cè)前腦HSP20與iNOS的表達(dá)；采用ELESA法檢測(cè)HSP20在動(dòng)脈血血清中的濃度；全部數(shù)據(jù)用SPSS15.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果： 1.HE染色：各缺血再灌注組中海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞均較正常組及假手術(shù)組減少；隨著再灌注后時(shí)間延長(zhǎng)，神經(jīng)元壞死增多，并伴有不同程度的膠

3、質(zhì)細(xì)胞增生，這種改變以缺血再灌注后3天和7天最為明顯。 2.免疫組化染色：正常對(duì)照組和各假手術(shù)組的腦組織無或僅見極少量的HSP20和iNOS陽(yáng)性表達(dá)；缺血再灌注后二者的表達(dá)均隨損傷時(shí)間延長(zhǎng)而上調(diào)且于第3天達(dá)到高峰，第7天可見表達(dá)下降但仍高于正常組和假手術(shù)組(p＜0.05)，各時(shí)間點(diǎn)比較p＜0.05。運(yùn)用直線相關(guān)性分析可知二者的表達(dá)呈正相關(guān)，其Pearson相關(guān)系數(shù)為0.884，P<0.05。 3.ELESA試驗(yàn)：正常組及

4、各假手術(shù)組的沙鼠動(dòng)脈血清中HSP20含量極低。腦缺血再灌注后6小時(shí)HSP20的含量迅速升高至最高峰，其濃度值自第1天開始下降，第3天及第7天繼續(xù)降低但仍高于正常組和假手術(shù)組(p<0.05)，不同時(shí)間點(diǎn)比較p<0.05。 結(jié)論： 1.HSP20在缺血再灌注腦組織中表達(dá)上調(diào)。 2.HSP20可能通過影響iNOS而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。 3.首次在腦缺血再灌注個(gè)體的動(dòng)脈血清中檢測(cè)到HSP20并發(fā)現(xiàn)其濃度-時(shí)間變化規(guī)