缺血預(yù)處理對大鼠局灶性腦缺血再灌注后神經(jīng)細胞凋亡和HSP70、GFAP表達的影響.pdf

1、目的：
　　 腦缺血的病理生理過程是一個多環(huán)節(jié)、多途徑及多因素的缺血性級聯(lián)反應(yīng)。許多預(yù)處理措施可誘導(dǎo)腦缺血耐受,如短暫的全身或局部腦缺血、缺氧、內(nèi)毒素、促炎細胞因子、麻醉劑等。耐受可在數(shù)分鐘內(nèi)快速形成(快速耐受),亦可在數(shù)小時至數(shù)天內(nèi)迅速建立起神經(jīng)保護狀態(tài)(延遲耐受)。其中,腦缺血預(yù)處理能增加腦組織對缺血的耐受。缺血預(yù)處理產(chǎn)生缺血耐受機制的研究經(jīng)歷了由大體水平到細胞水平,再到分子水平的發(fā)展過程,雖然到目前為止,腦缺血耐受產(chǎn)生的確

2、切機制尚不十分清楚,但大都認為預(yù)處理誘導(dǎo)缺血耐受分為早期效應(yīng)和延遲效應(yīng)。熱休克蛋白70(HSP70)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)被認為是缺血性損傷時敏感且可靠的指標。
　　 大量研究表明腦缺血預(yù)處理可減少神經(jīng)細胞凋亡。同時也有研究表明腦缺血預(yù)處理后HSP70和GFAP的表達明顯上調(diào)。但是,腦缺血預(yù)處理抑制神經(jīng)細胞凋亡的機制是否通過HSP70和GFAP的表達上調(diào)來完成尚不清楚。
　　 本研究的目的在于通過觀察缺血預(yù)處理后

3、大鼠局灶腦缺血后神經(jīng)細胞凋亡和HSP70、GFAP表達的變化探討腦缺血預(yù)處理減少神經(jīng)細胞凋亡機制。
　　 方法：
　　 成年健康SD大鼠72只,隨機分為預(yù)處理組,缺血組,假手術(shù)組,用大腦中動脈栓塞法制作腦缺血動物模型,假手術(shù)組除插線深度外,其余操作與缺血組相同。每組在造模成功后24h、48h、72h取出大鼠腦組織,免疫用組化(Immunohistochemistry,IHC)方法觀察各個時間觀察點HSP70蛋白和GFAP

4、蛋白的表達,同時應(yīng)用原位末端轉(zhuǎn)移酶標記技術(shù)(TUNEL染色)觀察各個時間觀察點細胞的凋亡情況。
　　 結(jié)果：
　　 免疫組化和原位末端轉(zhuǎn)移酶標記技術(shù)(TUNEL染色)結(jié)果顯示,HSP70蛋白和GFAP蛋白大腦皮質(zhì)等部位的細胞上呈陽性表達,其表達程度隨時間延長存在明顯差異。在缺血過程中,HSP70蛋白和GFAP蛋白的表達呈高度正相關(guān)。
　　 結(jié)論：
　　 1.腦缺血預(yù)處理可抑制神經(jīng)細胞凋亡。