方氏頭針對血管性癡呆大鼠海馬CA1區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、【目的】：觀察方氏頭針對血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力以及海馬CA1區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡蛋白Bcl-2表達的影響，從星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡的角度探討方氏頭針治療血管性癡呆的作用機制，為針刺治療血管性癡呆提供理論及實驗依據(jù)。
　　【方法】：將60只健康雄性SD大鼠隨機分為6組：模型組（VaD組）、模型加頭針組（VaD+F’SA組）、假手術(shù)組（Mock組）、假手術(shù)加頭針組（Mock+F’SA組）、正常組（Normal組）、正常加頭針組（Norma

2、l+F’SA組），每組10只，采用改良Pulsinelli四血管阻斷（4-vo）法制備血管性癡呆大鼠模型，VaD+F’SA組、Mock+F’SA組、Normal+F’SA組針刺頭部“倒臟上焦（雙側(cè)）、記憶（雙側(cè)）、思維”穴，每日1次，10日后，應(yīng)用Morris水迷宮測試各組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的變化，評價方氏頭針對血管性癡呆的治療效應(yīng)；采用免疫熒光雙重標(biāo)記技術(shù)以及免疫印跡法（Western-Blot）檢測各組大鼠海馬CA1區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡

3、相關(guān)蛋白Bcl-2表達的變化。
　　【結(jié)果】：1.Morris水迷宮行為學(xué)測試結(jié)果
　　與正常組及假手術(shù)組比較，模型組大鼠在定位航行試驗中的平均逃避潛伏期（escape latency）延長，空間探索試驗中第一次跨越原象限平臺的時間延長，2min內(nèi)跨越平臺次數(shù)減少(P<0.01)；與模型組比較，模型加頭針組大鼠平均逃避潛伏期明顯縮短，第一次跨越原象限平臺時間縮短，2min內(nèi)跨越次數(shù)增多，二者之間比較有顯著性差異(P<0.01

4、)；正常加頭針組、假手術(shù)加頭針組大鼠的平均逃避潛伏期及空間探索試驗成績較正常組及假手術(shù)組均有所好轉(zhuǎn)，組間比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；正常組與假手術(shù)組比較，二者之間無明顯變化（P>0.05）。
　　2.激光共聚焦顯微鏡下GFAP和Bcl-2共表達結(jié)果
　　模型組大鼠海馬CA1區(qū)GFAP和Bcl-2共表達的免疫熒光細(xì)胞較正常組及假手術(shù)組均明顯下降（P<0.01），而模型加頭針組大鼠海馬CA1區(qū)GFAP和Bcl-2共表達的免

5、疫熒光細(xì)胞較模型組顯著上調(diào)，二者比較，具有顯著性差異（P<0.01），正常加頭針組、假手術(shù)加頭針組大鼠CA1區(qū)GFAP和Bcl-2共表達的免疫熒光細(xì)胞較正常組及假手術(shù)組均有所上調(diào)，組間比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；正常組與假手術(shù)組相比則無明顯變化（均P>0.05）。
　　3.海馬CA1區(qū)Bcl-2蛋白水平的變化
　　血管性癡呆發(fā)生后，海馬CA1區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞中凋亡因子Bcl-2蛋白表達明顯下降（P<0.01），而方氏頭皮

6、針治療可明顯上調(diào)Bcl-2蛋白的表達，與模型組相比有顯著性差異（P<0.01），正常加頭針組、假手術(shù)加頭針組大鼠CA1區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞中Bcl-2表達較正常組及假手術(shù)組均有所上調(diào)，組間比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；正常組與假手術(shù)組相比則無明顯變化（均P>0.05）。
　　【結(jié)論】：1.方氏頭針能有效改善血管性癡呆大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力；
　　2.方氏頭針改善血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的治療效應(yīng)可能與上調(diào)大鼠海馬CA1區(qū)星形膠質(zhì)