方氏頭針對血管性癡呆大鼠海馬CA1區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、【目的】：觀察方氏頭針對血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力以及海馬CA1區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)的影響，從星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡的角度探討方氏頭針治療血管性癡呆的作用機(jī)制，為針刺治療血管性癡呆提供理論及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　【方法】：將60只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為6組：模型組（VaD組）、模型加頭針組（VaD+F’SA組）、假手術(shù)組（Mock組）、假手術(shù)加頭針組（Mock+F’SA組）、正常組（Normal組）、正常加頭針組（Norma

2、l+F’SA組），每組10只，采用改良Pulsinelli四血管阻斷（4-vo）法制備血管性癡呆大鼠模型，VaD+F’SA組、Mock+F’SA組、Normal+F’SA組針刺頭部“倒臟上焦（雙側(cè)）、記憶（雙側(cè)）、思維”穴，每日1次，10日后，應(yīng)用Morris水迷宮測試各組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的變化，評價方氏頭針對血管性癡呆的治療效應(yīng)；采用免疫熒光雙重標(biāo)記技術(shù)以及免疫印跡法（Western-Blot）檢測各組大鼠海馬CA1區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡

3、相關(guān)蛋白Bcl-2表達(dá)的變化。
　　【結(jié)果】：1.Morris水迷宮行為學(xué)測試結(jié)果
　　與正常組及假手術(shù)組比較，模型組大鼠在定位航行試驗(yàn)中的平均逃避潛伏期（escape latency）延長，空間探索試驗(yàn)中第一次跨越原象限平臺的時間延長，2min內(nèi)跨越平臺次數(shù)減少(P<0.01)；與模型組比較，模型加頭針組大鼠平均逃避潛伏期明顯縮短，第一次跨越原象限平臺時間縮短，2min內(nèi)跨越次數(shù)增多，二者之間比較有顯著性差異(P<0.01

4、)；正常加頭針組、假手術(shù)加頭針組大鼠的平均逃避潛伏期及空間探索試驗(yàn)成績較正常組及假手術(shù)組均有所好轉(zhuǎn)，組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；正常組與假手術(shù)組比較，二者之間無明顯變化（P>0.05）。
　　2.激光共聚焦顯微鏡下GFAP和Bcl-2共表達(dá)結(jié)果
　　模型組大鼠海馬CA1區(qū)GFAP和Bcl-2共表達(dá)的免疫熒光細(xì)胞較正常組及假手術(shù)組均明顯下降（P<0.01），而模型加頭針組大鼠海馬CA1區(qū)GFAP和Bcl-2共表達(dá)的免

5、疫熒光細(xì)胞較模型組顯著上調(diào)，二者比較，具有顯著性差異（P<0.01），正常加頭針組、假手術(shù)加頭針組大鼠CA1區(qū)GFAP和Bcl-2共表達(dá)的免疫熒光細(xì)胞較正常組及假手術(shù)組均有所上調(diào)，組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；正常組與假手術(shù)組相比則無明顯變化（均P>0.05）。
　　3.海馬CA1區(qū)Bcl-2蛋白水平的變化
　　血管性癡呆發(fā)生后，海馬CA1區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞中凋亡因子Bcl-2蛋白表達(dá)明顯下降（P<0.01），而方氏頭皮

6、針治療可明顯上調(diào)Bcl-2蛋白的表達(dá)，與模型組相比有顯著性差異（P<0.01），正常加頭針組、假手術(shù)加頭針組大鼠CA1區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞中Bcl-2表達(dá)較正常組及假手術(shù)組均有所上調(diào)，組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；正常組與假手術(shù)組相比則無明顯變化（均P>0.05）。
　　【結(jié)論】：1.方氏頭針能有效改善血管性癡呆大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力；
　　2.方氏頭針改善血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的治療效應(yīng)可能與上調(diào)大鼠海馬CA1區(qū)星形膠質(zhì)