急性冠脈綜合征表達(dá)OX40-OX40配體的臨床研究.pdf

1、冠心病是最常見(jiàn)的心血管疾病，動(dòng)脈粥樣硬化(AS)是其病理基礎(chǔ)。急性冠脈綜合征(ACS)是由于冠狀動(dòng)脈不穩(wěn)定動(dòng)脈粥樣硬化(AS)斑塊破裂繼發(fā)血栓形成，導(dǎo)致管腔嚴(yán)重狹窄或閉塞引起急性或亞急性心肌缺血的臨床綜合征；包括不穩(wěn)定型心絞痛(UA)、ST段抬高的心肌梗死(STEMI)和非ST段抬高心肌梗死(NSTEMI)。眾多資料顯示：ACS患病率逐年增高，目前已成為心血管疾病的“頭號(hào)無(wú)聲殺手”。ACS發(fā)生的病理基礎(chǔ)為AS易損斑塊的存在。AS的發(fā)生機(jī)

2、制是多因素綜合作用所誘發(fā)的機(jī)體應(yīng)答反應(yīng)。眾多研究表明，炎癥反應(yīng)及免疫介導(dǎo)在AS的發(fā)生及斑塊的破裂中起重要作用。大量研究證實(shí)，穩(wěn)定型心絞痛(SAP)患者體內(nèi)存在的多是穩(wěn)定斑塊，局部炎癥反應(yīng)輕，而ACS患者冠脈內(nèi)斑塊為不穩(wěn)定性斑塊，斑塊的纖維帽邊緣有大量炎癥細(xì)胞及細(xì)胞因子聚集，特別是激活的CD4+ T淋巴細(xì)胞，能積極參與AS斑塊的免疫與炎癥反應(yīng)。因此，T淋巴細(xì)胞的激活是AS重要的炎性致病因素。 OX40/OX40配體(OX40U)

3、是一對(duì)互補(bǔ)的跨膜糖蛋白，分別屬于腫瘤壞死因子(TNF)超家族和TNF家族的成員，是免疫應(yīng)答中一對(duì)協(xié)同刺激分子。OX40定位于活化的CD4+和CD8C+T細(xì)胞。OX40+T細(xì)胞是抗原特異性T細(xì)胞，只表達(dá)于活化的T細(xì)胞表面，集中于淋巴組織的T細(xì)胞區(qū)和外周炎癥部位。OX40L表達(dá)在多種細(xì)胞表面，包括樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)、B細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞以及某些組織細(xì)胞，OX40L還能以可溶性的形式存在于血漿中。OX40與其配體OX40L結(jié)合后，通

4、過(guò)抑制炎癥細(xì)胞凋亡，促進(jìn)活化后T淋巴細(xì)胞的存活和增殖，介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，影響了AS斑塊形成的進(jìn)程。OX40L基因已成為目前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證據(jù)最充分的動(dòng)脈粥樣硬化的易感基因。研究證實(shí)：OX40L基因單核苷酸多態(tài)性(SNP)與急性心肌梗死的易感性相關(guān)。但OX40和OX40L在ACS體內(nèi)表達(dá)水平與其發(fā)生、發(fā)展及臨床頇后目前仍不清楚。 本實(shí)驗(yàn)中，我們用間接免疫熒光流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)ACS組、SAP組及對(duì)照組的外周血淋巴細(xì)胞表達(dá)OX40、OX40L水平

5、，用酶聯(lián)免疫吸附法(EUSA)檢測(cè)各組血清可溶性O(shè)X40L(sOX40L)水平，并檢測(cè)急性心梗(AMI)患者血清sOX40L水平的動(dòng)態(tài)變化。所有入選者均經(jīng)冠脈造影，并對(duì)冠狀動(dòng)脈斑塊形態(tài)進(jìn)行評(píng)估，將冠脈病變分為復(fù)雜狹窄(復(fù)雜狹窄的特征為：①形態(tài)不規(guī)則或邊緣有扇形皺褶。②病變邊緣斷裂，凸出與血管壁成角。③表面有潰瘍形成。④有充盈缺損等冠脈內(nèi)血栓征象。)與光滑狹窄(無(wú)上述表現(xiàn)的冠脈狹窄為光滑狹窄)。分析ACS組血清sOX40L水平與冠脈復(fù)雜狹

6、窄的相關(guān)性。結(jié)果顯示：(1)ACS組外周血淋巴細(xì)胞表達(dá)OX40[AMI組：(7.40±1.56)％，UA組：(6.70±1.49)％]和OX40L[AMI組：(5.72±1.30)％，UA組：(5.50±1.13)％]明顯較SAP組[(2.54±0.56)％；(2.04±0.56)％]和對(duì)照組[(2.41±0.49)％；(1.94±0.58)％]高(P＜0.01)，SAP與對(duì)照組相比均無(wú)差異(P=0.064)。(2)ACS組血清sOX4

7、0L[AMI組：(9.43±2.34)ng/ml，UA組：(9.04±1.95)ng/ml]水平明顯較SA[(3.13±1.29)ng/ml]和對(duì)照組[(2.98±1.28)ng/ml]高(P＜0.01)，而SAP與對(duì)照組相比亦無(wú)明顯差異(P=0.47)。(3)AMI患者在發(fā)病后72小時(shí)內(nèi)血清sOX40L維持在較高水平，之后開(kāi)始漸降，一周左右降至SAP組水平。(4)ACS組血清sOX40L水平與冠脈病變復(fù)雜狹窄數(shù)呈顯著正相關(guān)(r=0.5

8、8，P＜0.001)。 為了進(jìn)一步說(shuō)明OX40—OX40L在ACS發(fā)病機(jī)制中與不穩(wěn)定斑塊之間的關(guān)系，本研究中，我們采用ELISA法分別檢測(cè)各組血清基質(zhì)會(huì)屬蛋白酶-9(MMP-9)水平和血清C—反應(yīng)蛋白(CRP)。并分析血清MMP-9、CRP與血清sOX40L水平的相關(guān)性。結(jié)果顯示：(1)ACS組血清MMP-9水平[AMI組：(61.35±22.97)ng/ml，UA組：(59.66±19.70)ng/ml]明顯較SAP組[(30

9、.51±12.72)ng/ml]和對(duì)照組[(29.78±11.94)ng/ml)]高(P＜0.01)，而SAP與對(duì)照組相比亦無(wú)明顯差異(P=0.70)，而且血清sOX40L水平與MMP-9呈顯著正相關(guān)(r=0.70，P＜0.001)。(2)ACS組血清CRP水平[(AMI組：(4.99±1.20)mg/L，UA組：(4.72±1.32)mg/L]明顯較SAP組[(1.41±0.40)mg/L]和對(duì)照組[(1.37±0.36)mg/L]高

10、(P＜0.01)，而SAP與對(duì)照組相比亦無(wú)明顯差異(P=0.41)，而且血清sOX40L水平與CRP呈顯著正相關(guān)(r=0.84，P＜0.001)。 總之，本實(shí)驗(yàn)研究表明，人的外周血淋巴細(xì)胞存在少量的OX40和OX40L的基礎(chǔ)表達(dá)，血清中sOX40L也處于較低的基礎(chǔ)水平，ACS患者外周血淋巴細(xì)胞表達(dá)OX40和OX40L的水平及血清sOX40L水平均明顯升高，而且血清sOX40L水平與冠脈復(fù)雜狹窄及血清MMP-9、CRP的水平呈顯著