35份石榴種質(zhì)的表型及ISSR遺傳多樣性分析.pdf

1、石榴（Punica granatum L.）為石榴科石榴屬落葉灌木或小喬木，該科植物僅1屬2種，一種為石榴，另一種為野生種僅分布于印度洋西部的索科特拉島上，無栽培價值。石榴原產(chǎn)伊朗、阿富汗等地，在長期傳播和栽培過程中因天然雜交、基因突變、實(shí)生、分株、嫁接、人為選擇等原因形成了不同變異資源。本文以保存在山東棗莊石榴資源圃的35份石榴種質(zhì)和類型為研究對象，采用 ISSR分子標(biāo)記技術(shù)分析這些資源遺傳多樣性及親緣關(guān)系分析，探討石榴種質(zhì)資源的來源

2、及其演變，為進(jìn)一步研究、保護(hù)、利用石榴種質(zhì)及選育新品種提供科學(xué)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：
　　1.對35份石榴種質(zhì)的產(chǎn)地、花色、花型及果皮顏色等進(jìn)行初步統(tǒng)計。從產(chǎn)地來分類可分為5類、從花色來分類可分為4類、從花型來分類可分為2類、從果皮顏色來分類可分為5類、從產(chǎn)地、花色、花型及果皮顏色均相同的可分為5類、供試的35份石榴種質(zhì)月季石榴又有6份種質(zhì)、牡丹石榴又有5份種質(zhì)、瑪瑙石榴又有3份種質(zhì)、酸石榴又有8份種質(zhì)、甜石榴又有3份種質(zhì)。以及

3、對部分石榴種質(zhì)的表型進(jìn)行了詳細(xì)的描述。
　　2.篩選出的8條ISSR隨機(jī)引物在35份石榴種質(zhì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，共擴(kuò)增出168個DNA位點(diǎn)，平均每條引物擴(kuò)增出21個DNA位點(diǎn)，其中有158個多態(tài)性性位點(diǎn)，多態(tài)性位點(diǎn)比率（P）為94.05％。8條ISSR引物擴(kuò)增的DNA位點(diǎn)數(shù)在16～24個，多態(tài)性位點(diǎn)比率在86.96%～100%，其中8條引物在35份種質(zhì)中多態(tài)性比率表現(xiàn)最低為引物UBC811是86.96%，而UBC816擴(kuò)增出的DNA位

4、點(diǎn)為16，位點(diǎn)數(shù)最少，但多態(tài)性位點(diǎn)比率最高，達(dá)100%。表明8條引物具有較好的多態(tài)性，35份石榴種質(zhì)的遺傳多樣性比較豐富。每條引物擴(kuò)增平均產(chǎn)生21個DNA位點(diǎn)和19.75個多態(tài)性位點(diǎn)，擴(kuò)增產(chǎn)生的DNA片段長度在101～2000 bp之間。結(jié)果表明，采用不同的ISSR引物對石榴種質(zhì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增出的位點(diǎn)數(shù)差異較大，但多態(tài)性位點(diǎn)的比例差異不大。
　　3.利用Popgene1.32軟件對35份石榴種質(zhì)的遺傳多樣性參數(shù)統(tǒng)計分析。結(jié)果

5、表明，平均觀察等位基因數(shù)（ Na）為1.9405，平均有效等位基因數(shù)（ Ne）為1.6785，平均Nei’s基因多樣性指數(shù)（He）為0.3799，平均Shannon信息指數(shù)（I）為0.5530，這些說明35份石榴種質(zhì)間的遺傳變異較大，種質(zhì)資源間存在比較豐富的遺傳多樣性。
　　4.利用 NTSYS2.10軟件，計算35份種質(zhì)間的遺傳相似系數(shù)（GS），根據(jù) GS值構(gòu)建35份種質(zhì)的 UPGMA親緣關(guān)系聚類圖，8條 ISSR引物能將35份