玉竹品種鑒定及其種質(zhì)遺傳多樣性的ISSR分析.pdf

1、玉竹是湖南邵東的傳統(tǒng)道地藥材，自清乾隆時(shí)期至現(xiàn)在已有近300年的種植歷史。邵東作為國(guó)家科技部玉竹規(guī)范化種植研究示范基地和湖南省科技廳玉竹規(guī)范化種植示范基地，由于長(zhǎng)期的自然選擇和人工選擇，已形成了極其豐富的種質(zhì)資源，特別是近年來(lái)廣大科技人員和藥農(nóng)在實(shí)踐中已精心選育了一系列的優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)品種。而對(duì)玉竹品種進(jìn)行鑒定、對(duì)種質(zhì)資源進(jìn)行評(píng)價(jià)，選育優(yōu)良品種并進(jìn)行推廣則是科技人員一項(xiàng)長(zhǎng)期而艱巨的任務(wù)。用傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)方法開(kāi)展上述工作往往受環(huán)境、植株生長(zhǎng)發(fā)育階

2、段以及科技工作者認(rèn)知能力等方面的影響，對(duì)形態(tài)學(xué)差別很小的玉竹品種要開(kāi)展這方面的工作困難較大。而利用分子生物學(xué)方面的技術(shù)，對(duì)玉竹品種從DNA分子水平上來(lái)進(jìn)行檢測(cè)和研究則可得到彌補(bǔ)。本研究采用ISSR 分子標(biāo)記技術(shù)，通過(guò)對(duì)反應(yīng)體系的優(yōu)化，PCR擴(kuò)增后獲得了清晰的電泳譜帶，適用于玉竹品種的鑒定和遺傳多樣性的分析。這為廣大科技工作者在玉竹品種鑒定和培育研究中提供了又一有力工具。主要研究結(jié)果如下：
　　 1、采用改良的CTAB提取法對(duì)富含

3、多糖的玉竹根莖基因組DNA 進(jìn)行提取，結(jié)果獲得了純度較高的DNA。這一方法適宜推廣至類似玉竹這類富含多糖成分的根及根莖類中藥材基因組DNA 的提取。
　　 2、依據(jù)PCR 反應(yīng)體系的組成和擴(kuò)增條件，對(duì)影響擴(kuò)增結(jié)果的一些重要參數(shù)采用單因素多水平實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)進(jìn)行體系的優(yōu)化，建立了穩(wěn)定的適用于玉竹品種鑒定和遺傳多樣性分析的ISSR-PCR體系。
　　 3、按建立的ISSR-PCR 體系對(duì)供試材料進(jìn)行擴(kuò)增，結(jié)果10條ISSR引