腰椎下肢金屬內(nèi)植物周圍界膜組織形態(tài)學(xué)、物理特性及細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：用掃描電鏡、X線衍射儀、質(zhì)譜儀、及TUNEL染色的方法研究下肢及腰椎金屬內(nèi)植物周圍界膜組織的物理化學(xué)成分、細(xì)胞凋亡、及血清金屬離子的濃度變化；用免疫組化方法研究腫瘤壞死因子(TNF-a)在界膜組織中的表達(dá)。 方法：試驗(yàn)分三組，20例行腰椎內(nèi)固定取出術(shù)的患者被編為A組，20例行下肢內(nèi)固定取出術(shù)的患者被編為B組，20例正常組織編為C組。 1、掃描電鏡觀察：取界膜組織制作成電鏡標(biāo)本，進(jìn)行電鏡下觀察及進(jìn)行能譜分析。

2、 2、X線衍射分析：取界膜組織，制成標(biāo)本，放入X線衍射儀進(jìn)行檢測(cè)。 3、TUNEL染色：取界膜組織，先作HE染色，再作TUNEL染色，光鏡下觀察結(jié)果。 4、用免疫組化的方法，用TNF-a的單克隆抗體作為一抗，對(duì)界膜組織中的TNF-a的表達(dá)水平進(jìn)行測(cè)試。 5、質(zhì)譜儀分析：取觀察對(duì)象的血清，放入非抗凝瓶中，取樣進(jìn)行質(zhì)譜儀分析。 結(jié)果： 1、掃描電鏡結(jié)果：電鏡下可見實(shí)驗(yàn)組樣品中有較多的類圓形及形狀不規(guī)則

3、的顆粒結(jié)構(gòu)，大小從0.5-10μm不等，呈彌散性分布；能譜分析中，可見B組中有K、Na、Mg、Fe、等元素成分分布，A組中有K、Na、Mg、Ti、A1、V分布，C組中含有K、Na、Mg金屬元素，由此得出Fe、Ti、A1、V為界膜組織中所特有的成分，而在正常組織中未測(cè)出此類物質(zhì)存在。 2、x線衍射分析結(jié)果：經(jīng)過掃描分析，C組的衍射圖為非晶胞圖像，未見有明顯晶體顆粒存在，而A、B組均呈現(xiàn)晶胞衍射圖，經(jīng)對(duì)照，和Ti、Fe衍射波形相吻合

4、，可以提示樣品中有微小Fe、Ti金屬顆粒。 3、TUNEL染色：TUNEL染色后，A、B組均可見到較多的棕褐色凋亡細(xì)胞，有呈集落樣分布，C組可見少量棕褐色細(xì)胞，凋亡指數(shù)B＞A＞C，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 4、TNF-a：A組中有10例界膜組織TNF-a表達(dá)陽性，而B組中有15列表達(dá)陽性，C組無陽性表達(dá)。 5、質(zhì)譜儀分析結(jié)果，三組樣本之間略有差別，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：腰椎下肢界膜組織中存在有相應(yīng)的金屬內(nèi)植物的元