骨髓細胞形態(tài)學檢查實驗課

1、骨髓形態(tài)學檢查,1,骨髓細胞形態(tài)學檢查,汕頭大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院,骨髓形態(tài)學檢查,2,骨髓血細胞檢查適應(yīng)癥,患者多次檢查外周血有異常 患者有原因未明的肝、脾、淋巴結(jié)腫大 查明惡性腫瘤有無轉(zhuǎn)移 對血液病進行診斷、鑒別診斷和療效觀察,骨髓形態(tài)學檢查,3,骨髓血細胞檢查禁忌癥,1.凝血因子嚴重缺乏的出血性疾病，如血友病。2.穿刺部位有炎癥或畸形。 3.晚期妊娠的孕婦。,骨髓形態(tài)學檢查,4,實驗內(nèi)容,1.判斷骨髓增生程度（低倍鏡）

2、2.巨核細胞計數(shù)（低倍鏡）3.有核細胞分類（油鏡）**4.填寫實驗報告**,骨髓形態(tài)學檢查,5,☆ 骨髓有核細胞增生程度,增生程度 成熟RBC與有核細胞之比 常見病增生極度活躍 1:1 各類白血病增生明顯活躍 10:1

3、 各類白血病 增貧增生活躍 20:1 正常骨髓、某些貧血 增生減低 50:1 慢

4、性再障增生重度減低 200:1 急性再障 、急停,骨髓形態(tài)學檢查,6,增生極度活躍（1:1):見于白血病,骨髓形態(tài)學檢查,7,增生明顯活躍（10:1）:見于白血病、增生性貧血,骨髓形態(tài)學檢查,8,增生活躍（20:1）:見于正常骨髓象、各型貧血,骨髓形態(tài)學檢查,9,增生減低（50:1）:見于造血功能低下,骨髓形態(tài)學檢查,10,增生極度減低

5、（200:1）:見于再障,骨髓形態(tài)學檢查,11,骨髓形態(tài)學檢查,12,☆ ☆巨核細胞計數(shù) 7-35個/片（1.5cm× 3.0cm）,1. 原始巨核細胞(0) 2. 幼稚巨核細胞(0～5%) 3. 顆粒型巨核細胞(10%～27%) 4. 產(chǎn)板型巨核細胞(44%～60%) 5. 裸核巨核細胞(8～30%),骨髓形態(tài)學檢查,13,☆ ☆ ☆有核細胞分類,選擇滿意的片膜段，觀察200個有核細胞，按

6、細胞的種類、發(fā)育階段分別計數(shù)，并計算它們各自的百分率。,骨髓形態(tài)學檢查,14,,干細胞,祖細胞,中幼紅,早幼紅,原紅,早幼粒,晚幼紅,中幼粒,原粒,晚幼粒,巨核系,淋巴系,單核系,漿細胞系,骨髓中血細胞根據(jù)細胞發(fā)育階段分為原始細胞、幼稚細胞及成熟細胞三個階段,骨髓形態(tài)學檢查,15,(一)粒細胞系統(tǒng),粒細胞系統(tǒng)在正常骨髓約占45%-70%，分為原始粒細胞、早幼粒細胞、中幼粒細胞、晚幼粒細胞、桿狀核粒細胞、分葉核粒細胞。,骨髓形態(tài)學檢查,

7、16,1、原始粒細胞（0-2%）,原始粒細胞I型：大?。?0～20 um，圓或不規(guī)則圓 形；胞漿：量少，染均勻透明或不透明的淡 藍或深藍色，無顆粒；胞核：大，圓或橢圓，位于中央或稍偏 位，占細胞3∕5～4∕5；染色質(zhì)：呈細砂粒狀均勻平坦，如一層 細砂，核膜薄，不明顯，淡紫 紅色；核仁：2～5個，淡紫藍色，小而清晰。,骨髓形態(tài)學

8、檢查,17,原始粒細胞II型,在I型基礎(chǔ)上胞漿有少數(shù) 細小顆粒（無具體標準）但無Golgi區(qū)（淡染區(qū)）,骨髓形態(tài)學檢查,18,2、早幼粒細胞（1～5%）,大?。?2～30um，略大于原粒，圓或橢圓形；胞漿：量增多，淡藍或深藍色，出現(xiàn)Golgi區(qū)（淡染區(qū)）；顆粒：出現(xiàn)大量略粗的嗜天青顆粒，顏色與核的色調(diào)一致，形態(tài)不規(guī)則， 圓形或三角形，大小不等，分布不均勻；早期早幼粒細 胞出現(xiàn)的顆 粒

9、較少，后期顆粒較多，甚至蓋于核上或聚于核的周圍。胞核：圓或橢圓，多偏位；染色質(zhì)：呈顆粒狀，較原始粒細胞粗，開始有些濃集，排列略緊；核仁：可以殘存或已消失；,骨髓形態(tài)學檢查,19,3、中幼粒細胞(胞漿出現(xiàn)特異性顆粒),大?。?0～18um；胞核：圓或橢圓，偏位，占細胞1∕2～2∕3，可有一側(cè)變平或稍凹陷，核膜清 楚，呈淡紅色；染色質(zhì)：呈粗顆粒狀，常有凝集感或呈小碎塊，但較均勻；核仁：消失；胞質(zhì)：豐富，淡藍或淡

10、粉紅色，可見淡染區(qū)；顆粒：中性顆粒細小而密集，呈淡紅色，粉沫狀；嗜酸性顆粒粗大，呈小珠狀，金 紅色、金黃色、藍紅色，有折光性，均勻布滿胞漿；嗜堿性顆粒最大，大小 不等，數(shù)目少，排列零亂，呈深藍色，易脫落，可覆蓋在核上。注：以顆粒的特性劃分中性、嗜酸性，嗜堿性，中性粒細胞，自中幼至晚、桿、分葉核粒細胞的劃分，完全以細胞核的變化為依據(jù)。,骨髓形態(tài)學檢查,20,粒細胞胞質(zhì)中四種顆粒的鑒別,鑒別點 非特異性

11、顆粒 中性顆粒 嗜酸性顆粒 嗜堿性顆粒大小 較中性顆粒粗大 細小 粗大 最粗大 大小不一 大小一致 大小一致 大小不一形態(tài)

12、 形態(tài)不一 細顆粒狀 圓形或橢圓形 形態(tài)不一色澤 紫紅色 淡紅或淡紫紅色 橘紅色 深紫紅或深紫黑色數(shù)量 少量或中等量 多 多 不一定，但常不

13、多 分布 核上 均勻 均勻 核上,,骨髓形態(tài)學檢查,21,4、晚幼粒細胞,大?。?0～16um；胞漿：量較多，因含特異性顆粒的不同，被分為中性晚幼粒細胞、嗜酸性

14、 晚幼粒細胞和嗜堿性晚幼粒細胞；胞核：較小、小于細胞的1/2，常呈腎形、豆形、半月形、闊帶形或豬腸 等，核一側(cè)開始凹陷，但凹陷程度不到核假設(shè)直徑的一半；染色質(zhì)：更粗糙，緊密；核仁：消失。,中幼粒細胞,晚幼粒細胞,骨髓形態(tài)學檢查,22,5、桿狀核粒細胞,大小：10～15um；胞核：多種形態(tài)，如s形、w形、v形帶狀核，其凹陷程度超過核假設(shè)直徑的一半；染色質(zhì)：濃集成山丘狀，呈深紫紅色；

15、胞漿：量較多，因含特異性顆粒不同，被分為中性桿狀核粒細胞、嗜酸性桿狀核粒細胞和嗜堿性桿狀核粒細胞。,骨髓形態(tài)學檢查,23,6、分葉核粒細胞,大?。?0～15um；胞核：2～5葉，葉與葉之間由核染色質(zhì)細絲或呈繩段樣染色質(zhì)相連；染色質(zhì)：呈深紫紅色塊狀；胞漿：多，因含特異性顆粒不同，被分為中性分葉核粒細胞，嗜酸性分葉核粒細胞和嗜堿性分葉核粒細胞。,骨髓形態(tài)學檢查,24,骨髓形態(tài)學檢查,25,粒細胞鑒別要點,原始粒細胞I型無顆粒，II型有

16、少數(shù)顆粒，核仁清楚，染色質(zhì)細顆粒狀；出現(xiàn)較大嗜天青顆粒和淡染區(qū)，則為早幼粒細胞；出現(xiàn)特異性顆粒，核仁消失，則為中幼粒細胞；核稍有凹陷，核凹陷程度少于1/2假設(shè)核直徑，為晚幼粒細胞；核凹陷程度超過1/2假設(shè)核直徑，為桿狀核粒細胞；核之間僅有細絲相連為分葉核粒細胞。,骨髓形態(tài)學檢查,26,骨髓形態(tài)學檢查,27,（二）紅細胞系統(tǒng)（占骨髓有核細胞15－25％）,原始紅細胞→早幼紅細胞→中幼紅細胞→晚幼紅細胞→成熟紅細胞。,骨髓形態(tài)

17、學檢查,28,胞體直徑15-20um,圓形或橢圓形，邊緣常有鈍角或瘤狀突起，胞質(zhì)量少，不透明深藍色，有油畫藍感，在核周圍常形成淡染區(qū)。胞核圓形、居中或稍偏于一旁，約占細胞直徑的4/5，核染色質(zhì)呈顆粒狀，比原粒細胞粗而密，核仁1-2個，大小不一，染淺藍色。,,原始紅細胞(0～1%),骨髓形態(tài)學檢查,29,早幼紅細胞(1%),胞體直徑10-18um，圓形或橢圓形，胞核圓或橢圓形，占細胞2/3以上，居中或稍偏位，核染色質(zhì)可濃集成粗密的小塊，較

18、原紅細胞粗糙，核仁模糊或消失，胞質(zhì)量多，染不透明藍或深藍色，仍可見瘤狀突起及核周淡染區(qū)。,骨髓形態(tài)學檢查,30,中幼紅細胞(約10%)：胞體直徑8-15um，圓形。胞核圓形或橢圓形約占細胞的1/2，核染色質(zhì)凝聚成索條狀或塊狀，其中有明顯空隙，宛如打碎墨硯感，核仁完全消失。胞質(zhì)內(nèi)血紅蛋白形成逐漸增多，嗜堿性物質(zhì)逐漸減少，因含不等量血紅蛋白，可呈不同程度的嗜多色性。,骨髓形態(tài)學檢查,31,晚幼紅細胞（約10%）,,胞體直徑7-10um，圓

19、形； 胞質(zhì)量較多，淺灰色或淺紅色； 胞核圓形，居中或偏位，占 細胞½以下； 核染色質(zhì)聚集成數(shù)個大塊或凝縮成紫黑色團塊狀。,骨髓形態(tài)學檢查,32,原始紅、早、中、晚幼紅比較,骨髓形態(tài)學檢查,33,(三) 淋巴細胞系統(tǒng),劃分原始、幼稚、成熟淋巴細胞,骨髓形態(tài)學檢查,34,淋巴細胞 (約20%)⑴ 大淋巴細胞：胞體圓形，直徑12-15um；胞質(zhì)較多，呈清澈的淡藍色，可有少量大小不等的嗜天青顆粒；胞核橢圓形稍

20、偏于一側(cè)，核染色質(zhì)排列緊密而均勻，濃染呈深紫紅色。⑵小淋巴細胞：胞體圓形，直徑6-10um；胞質(zhì)量很少，頗似裸核； 胞核圓形，核染色質(zhì)聚集緊密成大塊狀。,骨髓形態(tài)學檢查,35,（四 ）單核細胞系統(tǒng),分為原始單核、幼稚單核、成熟單核細胞 原始單核細胞：外形： 不規(guī)則形或圓形，直徑14-25μm胞漿： 灰蘭色，淺蘭色 ，似毛玻璃，不透 亮，有偽足，無顆粒。胞核： 不規(guī)則，有折疊扭曲

21、染色質(zhì)：纖細網(wǎng)狀，淺紫紅色，淡薄。核仁： 大，1-3個,骨髓形態(tài)學檢查,36,成熟單核細胞,胞體稍小直徑12-20μm胞漿量多，灰蘭色散布細小粉紅色顆粒核居中或偏一側(cè)形狀不規(guī)則，并有明顯扭曲折疊染色質(zhì)凝聚如篩底或粗線條狀在正常骨髓中<5%,骨髓形態(tài)學檢查,37,(五) 漿細胞系統(tǒng),1 原始漿細胞 2 幼稚漿細胞 3 成熟漿細胞,骨髓形態(tài)學檢查,38,成熟漿細胞,橢圓形，直徑8-20μm 胞漿豐富，

22、灰藍色，常見空泡，極少含有嗜天青顆粒，近核處明顯半圓形淡染區(qū) 核圓形，明顯偏位 染色質(zhì)粗凝塊，呈車輪狀結(jié)構(gòu)排列。,骨髓形態(tài)學檢查,39,骨髓形態(tài)學檢查,40,骨髓形態(tài)學檢查,41,骨髓形態(tài)學檢查,42,骨髓形態(tài)學檢查,43,骨髓形態(tài)學檢查,44,骨髓形態(tài)學檢查,45,實驗步驟,一、用低倍鏡（×10倍）找涂片體尾交界、 染色良好、細胞分布均勻的部位。二、滴上香柏油。三、用油鏡（×100倍）分