造血干細(xì)胞免疫逃逸機(jī)制的實驗研究.pdf

1、目的：免疫逃逸是干細(xì)胞的一個重要特征，它可以逃避宿主免疫系統(tǒng)的殺傷，與宿主形成嵌合體。本研究從細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞(CTL)、自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)及免疫耐受分子HLA-G等三個方面，對造血干細(xì)胞的免疫逃逸機(jī)制進(jìn)行初步探討，并對來源于外周血、骨髓和臍帶血的三種常用造血干細(xì)胞的免疫逃逸能力進(jìn)行比較，找到最適合用于移植的造血干細(xì)胞類型。 方法：(1)用免疫磁珠法分別從成人外周血、成人骨髓及臍帶血中分離外周血造血干細(xì)胞(PBSC)、骨髓

2、造血干細(xì)胞(BMSC)及臍帶血造血干細(xì)胞(CBSC)；(2)分別用免疫磁珠法及流式細(xì)胞分選法從成人外周血中分離CTL及NK細(xì)胞；(3)以CTL、外周血NK細(xì)胞和NK-92細(xì)胞系為效應(yīng)細(xì)胞，并分別以PBSC、BMSC、CBSC為靶細(xì)胞，以去除了造血干細(xì)胞的外周血單個核細(xì)胞為對照靶細(xì)胞，用乳酸脫氫酶(LDH)釋放法分析效應(yīng)細(xì)胞對靶細(xì)胞的殺傷率；(4)以CTL和外周血NK細(xì)胞為效應(yīng)細(xì)胞，并分別以PBSC、BMSC、CBSC為靶細(xì)胞，用克隆增殖

3、實驗分析效應(yīng)細(xì)胞對靶細(xì)胞增殖能力的抑制率；(5)用流式細(xì)胞術(shù)分析PBSC、BMSC、CBSC表面HLA-I類分子、HLA-Ⅱ類分子、NKp30配體(NKp30L)、NKp46配體(NKp46L)及HLA-G的表達(dá)情況。 結(jié)論：(1)三種造血干細(xì)胞對CTL和NK細(xì)胞都具有一定程度的免疫逃逸能力，其中對CTL的免疫逃逸能力沒有顯著性差異，而對NK細(xì)胞的免疫逃逸能力由高到低依次為：CBSC，BMSC，PBSC。(2)NKp30L、NKp