2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、第一部分 復(fù)制缺陷的重組腺病毒經(jīng)心包腔轉(zhuǎn)染豬急性心肌梗死模型的實驗研究 目的:建立豬急性心肌梗死模型,評價重組腺病毒經(jīng)心包腔的轉(zhuǎn)染效率及持續(xù)時間。 方法:應(yīng)用磷酸鈣沉淀方法制備攜帶大腸桿菌LacZ基因復(fù)制缺陷的重組腺病毒(Ad-LacZ),隨機將12頭中國小型豬分為實驗組和對照組,每組6頭。兩組豬均采用球囊堵塞前降支第一對角支遠端以建立心肌梗死模型,心肌梗死模型建立后即刻,采用經(jīng)皮劍突下穿刺方法,將中心靜脈導(dǎo)管插

2、入心包腔內(nèi)轉(zhuǎn)染Ad-LacZ。實驗組:以含膠原酶1200u及透明質(zhì)酸酶3000u的生理鹽水2ml預(yù)處理心包后,在心包腔內(nèi)注射含Ad-LacZ基因2.0×109p.f.u的生理鹽水液1ml;對照組:同樣方法預(yù)處理心包后,在心包腔內(nèi)注射生理鹽水1ml。分別于注射后3天、7天及28天處死動物,對缺血心肌進行染色及病理觀察。 結(jié)果:冠狀動脈造影證實前降支遠端完全閉塞,病理顯示心肌有缺血和梗死;實驗組注射Ad-LacZ基因后第3天、第7天

3、及28天后X-gal染色有陽性細胞,以第7天最明顯,對照組無陽性細胞。 結(jié)論:應(yīng)用球囊堵塞法可成功建立豬急性心肌梗死模型,膠原酶及透明質(zhì)酸酶預(yù)處理心包后,腺病毒載體可轉(zhuǎn)染缺血心肌,并持續(xù)表達4周。 第二部分 經(jīng)心包腔轉(zhuǎn)染腺病毒血管內(nèi)皮生長因子165基因?qū)ωi冠脈血管形成影響的研究 目的:探討以腺病毒為載體的血管內(nèi)皮生長因子165(Ad-VEGF165)基因經(jīng)心包腔轉(zhuǎn)染的表達規(guī)律,對缺血心肌血管生成的作用。

4、 方法:隨機將20頭中國小型豬分為實驗組和對照組,每組10頭,每組又分3d(n=2)、7d(n=2)及28d(n=2)三個亞組。采用球囊堵塞前降支第一對角支遠端建立心肌梗死模型,成模后即刻,實驗組:采用經(jīng)皮劍突下穿刺中心靜脈導(dǎo)管心包腔內(nèi)轉(zhuǎn)染,以含膠原酶1200u及透明質(zhì)酸酶3000u的生理鹽水2ml預(yù)處理心包后,在心包腔內(nèi)注射含Ad-VEGF165基因2.0×109pfu的生理鹽水液1ml;對照組:同樣方法預(yù)處理心包后,在心包腔內(nèi)

5、注射生理鹽水1ml。注射后3天、7天及28天分別用免疫組化、超聲心動圖對缺血心肌血管新生情況進行檢測,并以酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血漿、心包及心肌組織中Ad-VEGF165的表達。 結(jié)果:Ad-VEGF165基因經(jīng)心包腔轉(zhuǎn)染缺血心肌組織后,在心包及組織中成高表達,于7達到高峰,28天降至基線水平,血漿中無目的基因的表達;28天時,實驗組缺血心肌微血管密度(MVD)、心功能均明顯高于對照組[MVD,517.0±75.7/

6、mm2vs226.5±54.1/mm2,P=0.009;LVEF72.11±5.2%vs55.14±4.37%,P=0.005]。 結(jié)論:用膠原酶及透明質(zhì)酸酶預(yù)處理心包腔后,經(jīng)其轉(zhuǎn)染Ad-VEGF165可以誘導(dǎo)急性心肌梗死模型局部VEGF蛋白表達,促進缺血心肌組織血管新生并能改善心功能。 第三部分 重組腺病毒血管內(nèi)皮生長因子165基因心包腔與冠狀動脈轉(zhuǎn)染心肌的比較研究 目的:比較經(jīng)心包腔與冠狀動脈轉(zhuǎn)染重組

7、腺病毒血管內(nèi)皮生長因子165基因(Ad-VEGF165)的有效性。 方法:20頭小型豬隨機分為心包轉(zhuǎn)染組(心包組)和冠脈轉(zhuǎn)染組(冠脈組),兩組豬均采用球囊堵塞前降支第一對角支遠端以構(gòu)建心肌梗死模型,心包組在心肌梗死模型建立后即刻,采用經(jīng)皮劍突下穿刺將中心靜脈導(dǎo)管插入心包腔內(nèi),以膠原酶和透明質(zhì)酸酶預(yù)先處理心包,然后注射Ad-VEGF1651.0ml(2×109pfu);冠脈組在心肌梗死模型建立后即刻,經(jīng)冠脈注射Ad-VEGF165

8、1.0ml(2×109pfu),于注射前后3、7、28d分別測定組織內(nèi)VEGF水平、微血管密度(MVD)、心功能。 結(jié)果:心包組和冠脈組的心臟均表達有VEGF165基因,組織內(nèi)VEGF水平在7天時達高峰,28天時降至基線水平,前組高于后組(702±85pg/mlvs592±59pg/ml,P=0.026)。而兩組的微血管密度、心功能隨轉(zhuǎn)染時間延長均明顯增加,但心包組優(yōu)于冠脈組(28d,MVD,517.0±75.7/mm2vs32

9、6.4±24.1/mm2,P=0.001;FS,32.9±2.2%vs30.6±2.1%,P=0.049;LVEF,72.11±5.2%vs65.87±2.16%,P=0.034)。 結(jié)論:導(dǎo)管介導(dǎo)的心包腔與冠脈轉(zhuǎn)染Ad-VEGF165基因治療心肌缺血是有效的、切實可行的,而前者可能是更有前途的新方法。 第四部分 心包穿刺簡易裝置在基因轉(zhuǎn)染中的應(yīng)用 目的:探討自制心包穿刺裝置轉(zhuǎn)染心臟的安全性、可行性。方法

10、:應(yīng)用磷酸鈣沉淀方法制備攜帶大腸桿菌LacZ基因復(fù)制缺陷的重組腺病毒(Ad-LacZ),將12頭中國小型豬分為實驗組和對照組,采用球囊堵塞前降支第一對角支遠端,心肌梗死模型建立后即刻,采用自制簡易心包腔穿刺裝置經(jīng)皮劍突下穿刺,成功后置中心靜脈導(dǎo)管于心包腔內(nèi)并行轉(zhuǎn)染,28d后處死。實驗組:膠原酶1200u及透明質(zhì)酸酶3000u預(yù)處理心包后,在心包腔內(nèi)注射Ad-LacZ基因2.0×109p.f.u;對照組:同樣方法預(yù)處理心包后,在心包腔內(nèi)注

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