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文檔簡介
1、華中科技大學博士學位論文重組腺相關病毒介導的反義血管內皮生長因子抑制角膜新生血管的實驗研究姓名:周煉紅申請學位級別:博士專業(yè):眼科指導教師:胡燕華20040501華中科技大學同濟醫(yī)學院博士學位論文剪接方式來自同一基因,VEGFl2l和VEGFl65怒可溶性蛋囪,其中VEGFl65是最主娶麴巽梅奉,天然懿VEGF鼯表理出VEGFm的主要特性。VEGF是一種商液特異性的盛管內皮細胞肖絲分裂素,與其受體結含后,具有促進內皮細胞增殖、遷移的作用
2、,從而加速新生血管的形成,VEGF在體內,還縣有增宓鑫管逶透性戇修,孽l。因此,在缺氧、炎痰及外強等媾況下,vEGF霹促進出斑、漏血和不成熟的新生血管形成。由于VEGFl65在皿管生成的生理和病理過程中起中心調控作用,我們試圖逶過隰叛VEGF㈦粒l乍弼,鼓露季【|l利病理狀況下角膜瑟壘纛管的形殘。爨1990年美國的一名腺苷脫氨酶歌乏癥患者接受基因治療并獲得成功后,艇因治療已取得很大的j敷展。所謂基因治療是指通j過在特定靶細胞中表達該細胞
3、本來不表達懿基因,袋采蔫特定方式關凌、李露鍵舅鬻表達懿鏊因,達翼浚療疾病的目的。限作為基因治療的靶器官,具有與生俱來的優(yōu)越性,眼球閡其屈光問質透明,位鍶表淺易于接j慝,可進行精確的定位轉染,亦有利于纂因轉移遭壤夔褒寨。勞燕羲痔是免痰教受區(qū),爨蠢戇臻懿免疫舉特性,鴦潮予目的基因的轉染及襲達。目前跟瘸的基因治療研究方興未=i=,基因治療所需的關鍵技術,便是能將外源的目的基本轉移到人體,并能有效地適度表達,困魏載臻技本在基鬻治療中占鴦一分重要
4、戇逡經(jīng)。理想戇魏髂應該是能將霾的基因辱入相應靶器官,并安全、有效和長期穩(wěn)定的表達。本研究利用重組腺相關病毒(rAAV)作為基因治療的裁體,使用反義RNA羧零,疆顴毅黛鑫譬彩或避稷中VEGF豹l車瘸,簌毳蟄蘩l純學澆痿蕊霜膜新生施管的形成。熬個研究分為三部分。第~部分,高滴度重組腺相關病毒的包裝、純化及滴發(fā)測定。本研究所采弱豹rAAV是一耱凝型夔,專廣泛痤愛茲豢豹萋囂浚療懿簸缽,莢密主范圍廣,使用安全,無致病性和免痰源性,其最大的特點是可
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