新型Alzheimer病動(dòng)物模型的建立.pdf

1、阿爾茨海默氏癥（Alzheimer’s disease，AD）是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，于1906年由德國精神病學(xué)家和神經(jīng)病理學(xué)家阿洛伊斯·阿爾茨海默首次描述并以他的名字命名，是老年人認(rèn)知障礙的一個(gè)最常見的原因，在年齡超過65歲的老年人中患病率為5％~10%，而在年齡超過85歲的老年人中，患病率超過50%?；颊咧饕憩F(xiàn)為進(jìn)行性記憶喪失和認(rèn)知功能障礙，嚴(yán)重危及人類的健康和生活。近年來阿爾茨海默氏癥的發(fā)病率呈逐年上升趨勢。由于阿爾茨海默

2、氏癥發(fā)病受多種因素影響，病因病理機(jī)制十分復(fù)雜，目前尚沒有治愈的方法，隨著病情的發(fā)展，將最終導(dǎo)致病人的死亡。探索阿爾茨海默氏癥發(fā)病的機(jī)理，尋求有效地防治疾病的措施成為現(xiàn)今研究的熱點(diǎn)?，F(xiàn)階段的研究成果顯示阿爾茨海默氏癥與腦內(nèi)的炎癥反應(yīng)有著密切的聯(lián)系，腦內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞活化等免疫反應(yīng)是阿爾茨海默氏癥發(fā)生和病程惡化的關(guān)鍵。同時(shí)β淀粉樣蛋白的沉積和老年斑的形成也與炎癥相關(guān)。但目前阿爾茨海默氏癥模型中，以腦內(nèi)免疫反應(yīng)為引發(fā)機(jī)制的十分稀少。而采用LPS腦

3、內(nèi)注射引發(fā)的模型造模效果并不理想。以此為切入點(diǎn)，本文從行為學(xué)，病理學(xué)等多方面探討了基于遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（IV型超敏發(fā)型，delayed-type hypersensitivity，DTH）原理，采用2,4-二硝基氯苯(Dinitrochlorobenzene，DNCB)全身致敏，側(cè)腦室注射攻擊造成阿爾茨海默氏癥模型的方法。為探索阿爾茨海默氏癥的發(fā)病機(jī)制和有效防治方法提供依據(jù)。
　　目的：基于阿爾茨海默氏癥的免疫學(xué)機(jī)制，通過 DNCB

4、全身致敏，側(cè)腦室攻擊誘發(fā)腦內(nèi)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的方法建立阿爾茨海默氏癥新模型。
　　方法：對(duì)小鼠進(jìn)行全身致敏處理和水迷宮訓(xùn)練，一段時(shí)間后進(jìn)行 DNCB側(cè)腦室注射攻擊。之后進(jìn)行定位航行實(shí)驗(yàn)、空間搜索實(shí)驗(yàn)、自主活動(dòng)實(shí)驗(yàn)等行為學(xué)實(shí)驗(yàn)。最后對(duì)胸腺指數(shù)，脾臟指數(shù)、腦指數(shù)、腦含水量等數(shù)據(jù)采集處理，并對(duì)腦病理切片進(jìn)行蘇木精和伊紅（Hematoxylin and eosin stain，HE）染色，觀察病理改變。
　　結(jié)果：DNCB可成功對(duì)小鼠

5、進(jìn)行全身致敏并在攻擊后產(chǎn)生遲發(fā)型過敏反應(yīng)，造成小鼠體重增長緩慢，胸腺指數(shù)，脾臟指數(shù)升高。耳殼攻擊可引發(fā)明顯的耳腫脹。腦內(nèi)攻擊則可引發(fā)明確的認(rèn)知障礙和腦損傷。Morris水迷宮定位航行實(shí)驗(yàn)潛伏期明顯延長，空間搜索實(shí)驗(yàn)在平臺(tái)所在象限停留時(shí)間顯著降低。同時(shí)自主活動(dòng)次數(shù)也有所減少。腦內(nèi)產(chǎn)生炎性水腫，腦指數(shù)和腦含水量明顯升高。病理切片顯示海馬區(qū)錐形細(xì)胞損傷和腦內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞活化。
　　結(jié)論：基于阿爾茨海默氏癥的免疫學(xué)機(jī)制，通過 DNCB全身致