新型胰頭癌動物模型建立及應(yīng)用.pdf

1、第一部分：兔胰頭癌動物模型的建立
　　目的：建立穩(wěn)定可靠的兔胰頭癌動物模型，選擇最佳的模型制作方法。
　　方法：48只兔隨機(jī)分為2組，每組24只，分別采用瘤塊懸液法、瘤塊植入法制作兔胰腺頭癌動物模型，計量數(shù)據(jù)比較采用t檢驗(yàn)及Levene檢驗(yàn)，分別于1、2、3周及4周處死兔子行移植組織解剖和病理學(xué)檢查，觀察兩種不同建模方式的腫瘤生長情況及生物學(xué)形態(tài)。
　　結(jié)果：建模過程中，二種方法成瘤率均為100%，瘤塊植入法術(shù)后1周、

2、2周、3周及4周腫瘤體積分別為0.90±0.13cm3，3.44±0.41cm3，7.53±0.69cm3，36.75±5.93cm3，瘤塊懸液法術(shù)后1周、2周、3周及4周腫瘤體積分別1.15±0.21cm3，4.94±1.64cm3，9.47±4.26cm3，46.31±16.77cm3。對術(shù)后腫瘤體積進(jìn)行比較，術(shù)后第1周比較差別有統(tǒng)計學(xué)意義，術(shù)后2周、3周及第4周差別無統(tǒng)計學(xué)意義。術(shù)后第1周兩組動物均未發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移，瘤塊植入法第2周未見

3、種植性轉(zhuǎn)移，第3周5只兔子（83.33%）大網(wǎng)膜出現(xiàn)轉(zhuǎn)移，瘤塊懸液法第2周1只兔子（16.67%）、第三周4只兔子（66.67%）出現(xiàn)結(jié)腸、盲腸及腹壁種植性轉(zhuǎn)移，2只兔子（33.33%）出現(xiàn)大網(wǎng)膜轉(zhuǎn)移。微觀病理顯示瘤塊與種植前瘤塊病理形態(tài)基本一致，大部分瘤塊懸液法HE染色下圖像可見中間有較多壞死組織。瘤塊植入法瘤塊較瘤塊懸液法腫瘤生長更為穩(wěn)定。
　　結(jié)論：本研究成功建立了兔胰頭癌動物模型，研究結(jié)果顯示瘤塊植入法是建立兔胰頭癌動物模

4、型的較佳方法。
　　第二部分：兔保留幽門胰十二指腸切除術(shù)后消化道重建：胰胃吻合術(shù)與胰腸吻合術(shù)
　　目的：建立模擬人胰頭癌保留幽門胰十二指腸切除術(shù)（PPPD）胰胃吻合及胰腸吻合的動物模型，以確定吻合方式是否影響胰腺的內(nèi)分泌功能，胰瘺在兩種吻合方式是否存在差別，從病理角度說明胃內(nèi)強(qiáng)酸環(huán)境對吻合口影響及胰胃吻合對胃腸道內(nèi)環(huán)境影響。
　　方法：新西蘭大白兔40只，隨機(jī)分為兩組，每組20只，第一組胰胃吻合組，胰腺殘端與胃后壁吻合

5、；第二組胰腸吻合組，胰腺殘端與空腸吻合。計量數(shù)據(jù)比較采用t檢驗(yàn)及Levene檢驗(yàn)，率的分析采用Pearson X2檢驗(yàn)。對兩組動物術(shù)前及術(shù)后血糖進(jìn)行比較，以找出兩組之間是否存在差異；術(shù)中行胃造瘺，術(shù)前、術(shù)后第1天、術(shù)后第6天及術(shù)后2周檢測胃pH值，對術(shù)前術(shù)后pH值進(jìn)行比較，以找出兩者之間是否存在差異；對術(shù)后死亡兔子取腹腔積液檢查胰淀粉酶以確定是否存在胰瘺；術(shù)后2周處死兔子取胰腺組織、吻合口處胰腺組織、胃腸粘膜及吻合口周圍粘膜組織行病理檢

6、查，找出兩組之間是否存在差異。
　　結(jié)果：兩組動物中僅胰腸吻合組4例發(fā)生胰瘺，Pearson X2檢驗(yàn)示差別有統(tǒng)計學(xué)意義，血糖及淀粉酶術(shù)前基礎(chǔ)水平分別為：胰腸吻合組6.03±1.23mmol/l,265.50±30.37∪/l；胰胃吻合組6.54±1.31mmol/l，256.25±21.40∪/l。t檢驗(yàn)兩組動物血糖及血淀粉酶差別無統(tǒng)計學(xué)意義。對兩組動物術(shù)前術(shù)后血糖差異進(jìn)行比較，采用t檢驗(yàn)及Levene檢驗(yàn)，兩組動物術(shù)前術(shù)后血糖

7、差異有統(tǒng)計學(xué)意義。分別對兩組動物術(shù)后第1天、第1周及第2周血糖差異比較，無統(tǒng)計學(xué)意義。對兩組動物術(shù)前術(shù)后胃pH值進(jìn)行檢測分別為：胰腸吻合組術(shù)前、術(shù)后第1、6天及術(shù)后2周分別為1.77±0.35，2.50±0.20，1.86±0.27，1.69±0.24；胰胃吻合組術(shù)前、術(shù)后第1天、術(shù)后第6天及術(shù)后2周分別為1.87±0.25，2.36±0.21，1.76±0.26，1.91±0.31。兩組動物術(shù)前pH值差別無統(tǒng)計學(xué)意義，分別對兩組動物術(shù)

8、前與術(shù)后第6天及術(shù)后兩周pH值進(jìn)行比較，差別無統(tǒng)計學(xué)意義，術(shù)前與術(shù)后第1天差別有統(tǒng)計學(xué)意義。兩周后取胰腺組織、吻合口處胰腺組織、胃腸粘膜及吻合口周圍粘膜組織病理檢查，兩組動物病理變化均相似。
　　結(jié)論：模擬人胰頭癌保留幽門胰十二指腸切除術(shù)（PPPD）胰胃吻合及胰腸吻合的動物模型中吻合方式并不影響胰腺內(nèi)分泌功能，胰胃吻合對術(shù)后胃內(nèi)pH值影響不大，胃內(nèi)強(qiáng)酸環(huán)境并不影響胰胃吻合口愈合，從病理角度來看短期內(nèi)胰胃吻合對胃腸道粘膜沒有影響，胰