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文檔簡介
1、 目的:本研究檢測PVR視網(wǎng)膜前膜中和在PVR形成過程中起關(guān)鍵性作用的視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)細胞中tTG的表達情況,探討tTG是否參與了PVR的發(fā)病過程,為進一步明確PVR的發(fā)病機制和尋找更為有效的治療方法提供理論依據(jù)。 方法:收集孔源性視網(wǎng)膜脫離合并PVR患者的視網(wǎng)膜前表面增生膜21例,8例為C級,13例為D級。取死亡12h以內(nèi)、角膜移植術(shù)后的正常供體眼球6例,采用胰蛋白酶消化法,獲得人RPE細胞進行原代及傳代培養(yǎng)。抽取PVR
2、患者的玻璃體液15例和角膜移植術(shù)后供體眼球的正常玻璃體液6例。PVR視網(wǎng)膜前膜固定后常規(guī)制作石蠟切片,先行HE染色,結(jié)構(gòu)完整者行免疫組織化學染色。培養(yǎng)3~5代的人RPE細胞接種于蓋玻片表面并平均分為3組,分別用含有10﹪PVR玻璃體液、正常玻璃體液和PBS的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)3組細胞,固定后行免疫細胞化學染色。光鏡下觀察tTG的表達和分布,計算C級和D級膜的表達陽性率,并采用MetaMorph/DP10/BX41顯微圖像分析系統(tǒng)測量3組
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