Rho-Rho激酶信號通路在大鼠急性壞死性胰腺炎中的作用及機制初探.pdf

1、急性壞死性胰腺炎(acute necrosis pancreatitis，ANP)的發(fā)病機制仍不明確，可能與胰酶的激活、胰腺微循環(huán)障礙、炎性細胞因子過度激活、氧自由基的作用等有關。最近研究表明，Rho/Rho激酶信號通路是體內重要的分子開關，參與多種生物學行為，如調節(jié)胰酶的分泌、氧自由基的形成等。Y-27632可抑制Rho激酶，被廣泛用于研究和闡明Rho/Rho激酶信號通路的體內生物學效應。對于Rho/Rho激酶信號通路在ANP中的作用

2、的研究國內未見報道。
　　 目的：觀察抑制Rho/Rho激酶信號通路對大鼠ANP的影響，并探討其作用機制。
　　 方法：24只健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，體重240-280g，隨機分成3組：ANP組(A組)、Rho/Rho激酶抑制劑Y-27632預處理組(B組)、生理鹽水對照組(C組)。A組采用3.5％?；悄懰徕c溶液(1ml/kg)逆行注入胰膽管建立ANP模型。B組于術前30min腹腔內注射Y-27

3、632(5mg/kg)，余處理同A組。C組采用生理鹽水逆行注入胰膽管。各組術后4h尾靜脈采血，24h處死動物。觀察：(1)胰腺大體炎癥改變；(2)血清淀粉酶的動態(tài)變化；(3)血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、丙二醛(maleic dialdehyde，MDA)的改變；(4)胰腺組織髓過氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)的改變；(5)胰腺組織病理學改變；(6)免疫組化檢測Rho相關蛋白

4、激酶I(Rho-associatedprotein kinase I，ROCK I)的改變。
　　 結果：(1)胰腺大體改變：A組胰腺呈灰白色，無光澤，充血水腫明顯，可見大片壞死，胰腺表面及胃網膜可見皂化斑，腹腔內有血性腹水；B組胰腺呈暗紅色，無光澤，充血水腫明顯，小片狀壞死，胰腺皂化斑少，腹腔內腹水顏色清亮；C組胰腺呈粉紅色，光澤度好，無水腫，腹腔內無腹水或少量清亮腹水，無皂化斑。
　　 (2)血清淀粉酶變化：在4h、

5、24h觀察點，各組淀粉酶分別為：A組(3747.38±256.90，2933.75±181.78)；B組(1694.25±326.58，1323.25±313.53)；C組(902.25±92.02，646.75±102.81)。在各觀察時間點A組和B組淀粉酶明顯升高，與C組相比差異具有顯著性統(tǒng)計學意義(P<0.01)；A組與B組相比差異具有顯著性統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
　　 (3)A組大鼠血清SOD值明顯下降，MDA值明

6、顯升高，與C組比較差異具有顯著性統(tǒng)計學意義(P<0.01)。B組能減少SOD的下降及MDA的升高，與A組比較差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 (4)ANP大鼠胰腺組織。MPO活性明顯升高，Y-27632抑制Rho/Rho激酶信號通路可減少MPO的活性升高。各組大鼠胰腺組織MPO活性兩兩比較，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)
　　 (5)胰腺組織病理學損傷評分：A組大鼠胰腺損傷評分明顯升高，與C組比較差異具有顯

7、著性統(tǒng)計學意義(P<0.01)。B組大鼠胰腺損傷評分與A組相比明顯下降，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 (6)ROCK I蛋白在胰腺組織的表達變化：A組可見ROCK I強陽性表達棕黃色，B組可見ROCK I陽性表達淡黃色，C組可見ROCK I弱陽性表達淺黃色。ROCK I蛋白半定量分析，各組差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 結論：(1)Y-27632可以抑制Rho/Rho激酶信號通路，減少ROCK1