綠原酸與三種生物大分子相互作用的研究.pdf

1、蛋白質(zhì)作為參與生命活動的主要物質(zhì)，在生命過程中起著極其重要的作用。隨著蛋白質(zhì)研究的逐步深入，人們對蛋白質(zhì)與配體分子相互作用的研究也成為生命科學研究的熱點之一。研究蛋白質(zhì)與小分子物質(zhì)之間的相互作用，不僅可以揭示二者相互作用的配位本質(zhì)，了解蛋白質(zhì)的構(gòu)象變化，而且對改進和發(fā)展分析蛋白質(zhì)的新方法有促進作用。本論文采用紫外-可見吸收、熒光、圓二色譜、傅立葉紅外等分子光譜法，以溶菌酶、牛血清白蛋白和人血清蛋白為模型蛋白，研究這三種蛋白質(zhì)與小分子物質(zhì)

2、綠原酸的相互作用機理。本論文包括四個章節(jié)內(nèi)容。
　　 第一章文獻綜述。這一章簡要介紹了小分子綠原酸的特性及其應用，三種模型蛋白溶菌酶、牛血清蛋白和人血清蛋白的結(jié)構(gòu)和功能性質(zhì)，概述了研究蛋白質(zhì)與小分子物質(zhì)相互作用的研究方法及意義。
　　 第二章綠原酸與溶菌酶相互作用的研究。本章研究了在不同pH條件下綠原酸的吸收光譜的變化，結(jié)果表明:吸收圖譜在峰形及峰位置上均發(fā)生了明顯變化。結(jié)合各種光譜法（紫外-可見吸收光譜、熒光光譜、圓二

3、色譜以及傅立葉紅外光譜），探討了綠原酸與溶菌酶的相互作用。熒光光譜結(jié)果表明:綠原酸能有規(guī)律地猝滅溶菌酶的內(nèi)源熒光，低濃度綠原酸與溶菌酶間的相互作用為靜態(tài)猝滅過程，而當綠原酸濃度上升到4.0×10-5mol/L時，兩者間的熒光猝滅過程變?yōu)閯討B(tài)猝滅。參照猝滅常數(shù)及熱力學參數(shù)計算公式推導出兩者的作用類型及結(jié)合位點數(shù)，非輻射能量轉(zhuǎn)移理論測定出兩者間的結(jié)合距離r值為3.65nm。CD及FT-IR分析了綠原酸結(jié)合后對溶菌酶空間構(gòu)象的變化，酶構(gòu)象向緊

4、密方向改變，α-螺旋的含量增加。最后，測定了綠原酸作用后對溶菌酶酶活力的影響，結(jié)果表現(xiàn)為激活作用。
　　 第三章綠原酸與血清蛋白相互作用的研究。本章利用紫外-可見吸收光譜、熒光光譜、圓二色譜對比研究了綠原酸與兩種血清蛋白在生理條件下的相互作用。分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)綠原酸與兩種血清蛋白的相互作用的機理幾乎一致，作用類型均為靜電相互作用。猝滅常數(shù)及結(jié)合位點數(shù)的研究表明HSA與CA的結(jié)合作用更強。圓二色譜分析得出，綠原酸的存在使兩種血清蛋白的