喹諾酮藥物與生物大分子的相互作用.pdf

1、蛋白質(zhì)、脫氧核糖核酸(DNA)是組成生命的重要的生物大分子，具有各自的生物功能，對(duì)一切生命現(xiàn)象都起著至關(guān)重要的作用。在分子水平上闡明這些生物大分子與小分子、離子，特別是藥物分子的相互作用，是當(dāng)前生命科學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、藥學(xué)化學(xué)及化學(xué)等眾多領(lǐng)域的重要研究課題。喹諾酮藥物是目前廣泛應(yīng)用于臨床的一大類抗菌藥物，但其藥效作用機(jī)理、毒副作用等方面仍需不斷深入研究。生物體內(nèi)含有多種金屬元素，它們參與許多重要的生命過程，且金屬離子能與喹諾酮藥物發(fā)生配位作

2、用形成配合物，也可與蛋白質(zhì)等生物大分子發(fā)生結(jié)合反應(yīng)。本論文研究喹諾酮藥物、金屬離子與生物大分子的相互作用，包括三個(gè)部分： 第一部分以小牛胸腺DNA(CT-DNA)、過渡金屬離子(Fe3+、Cu2+)及喹諾酮藥物(帕珠沙星、巴洛沙星)為研究對(duì)象，用熒光光譜法、紫外吸收光譜法與粘度法研究了喹諾酮藥物與CT-DNA之間的相互作用。光譜實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，金屬離子(Fe3+、Cu2+)和CT-DNA均能使帕珠沙星、巴洛沙星的熒光強(qiáng)度出現(xiàn)降低現(xiàn)

3、象，且金屬離子存在能使CT-DNA對(duì)喹諾酮藥物的猝滅作用顯著增強(qiáng)。根據(jù)熒光強(qiáng)度變化和熒光猝滅公式求得金屬離子與喹諾酮藥物體系間的熒光猝滅常數(shù)和結(jié)合常數(shù)，并推得其熒光猝滅是由形成復(fù)合物(配位數(shù)接近1)的靜態(tài)猝滅過程所致。粘度實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明帕珠沙星、巴洛沙星與CT-DNA間的結(jié)合作用為溝槽結(jié)合，而非嵌插結(jié)合。 第二部分以過渡金屬離子(Fe3+、Cu2+)、牛血清白蛋白(BSA)與喹諾酮藥物(帕珠沙星、巴洛沙星)為研究對(duì)象，利用藥物分子

4、對(duì)蛋白質(zhì)分子的熒光具有猝滅作用這個(gè)特征，用熒光光譜和紫外光譜相結(jié)合的方法對(duì)BSA與喹諾酮藥物相互作用的機(jī)理進(jìn)行了探討。帕珠沙星、巴洛沙星都能使BSA的內(nèi)源熒光產(chǎn)生規(guī)律性的猝滅，其熒光猝滅機(jī)制屬于因復(fù)合物的形成而引起的靜態(tài)猝滅。通過實(shí)驗(yàn)研究確定了BSA與帕珠沙星、巴洛沙星之間的結(jié)合常數(shù)和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)，基于F(o)rster非輻射能量轉(zhuǎn)移理論測(cè)定了這兩種喹諾酮藥物與BSA之間的結(jié)合距離和能量轉(zhuǎn)移效率。同時(shí)還考察了金屬離子(Fe3+、Cu2+)

5、對(duì)喹諾酮藥物-BSA間結(jié)合的影響。Cu2+離子促進(jìn)了帕珠沙星與BSA之間的結(jié)合作用，而Fe3+離子減弱了帕珠沙星與BSA之間的結(jié)合作用；Fe3+、Cu2+離子均促進(jìn)了巴洛沙星與BSA之間的結(jié)合作用。 第三部分以銅離子、加替沙星與C-藻藍(lán)蛋白為研究對(duì)象，用熒光光譜法和紫外光譜法研究了銅離子存在下加替沙星與C-藻藍(lán)蛋白相互作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，銅離子能與加替沙星形成穩(wěn)定的復(fù)合物，而與C-藻藍(lán)蛋白形成不穩(wěn)定的復(fù)合物；加替沙星與藻藍(lán)蛋白的