高鹽對建立大鼠動脈粥樣硬化模型中MMP-2和TIMP-2的影響.pdf

1、目的：在高脂鉗夾法建立頸動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)動物模型的基礎上探討高鹽在其中的作用；檢測MMP-2和TIMP-2在實驗中的變化，從而進一步探討高鹽對其表達的影響，進而對動脈粥樣硬化的研究、預防、治療開辟新的方法和途徑。
　　 材料與方法
　　 1將40只雄性SD大鼠隨機分為4組，即正常對照組、高脂鉗夾鹽量正常組，高脂鉗夾6倍高鹽組，高脂鉗夾12倍高鹽組(除正常對照組外，各組均給予鉗夾左側頸總

2、動脈手術和高脂飼料喂養(yǎng))，在實驗第2、6、10周末斷尾取血測血脂并于10周末測血壓。
　　 2在鹽量不同的各組已建成的大鼠頸動脈粥樣硬化模型基礎上，于10周末取左側頸總動脈進行HE染色及透射電鏡切片檢測以觀察動脈病理改變。先應用免疫組化的方法，觀察MMP-2和TIMP-2在各組頸動脈中的表達和分布，再應用RT-PCR的方法，觀察MMP-2mRNA、TIMP-2mRNA在各組頸動脈中的動態(tài)變化。統(tǒng)計學分析：采用SPSS13.0軟件

3、包對數(shù)據(jù)進行分析，各組數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(x±s)表示，兩組間比較采用T檢驗，組間比較采用單因素方差分析，以P<0.05表示差異顯著。
　　 結果
　　 1、血清學及血壓觀察
　　 與正常對照組相比，正常鹽及6倍鹽、12倍鹽組在2、6、10周末的TG、TC、LDL和10周末的血壓水平均增高(P<0.05)；且各組間隨著時間的推移，血脂也是逐漸增高的。
　　 2、肉眼大體觀察
　　 喂養(yǎng)10周時，正

4、常組大鼠的左頸總動脈活體狀態(tài)下柔軟而有彈性，顏色粉紅均勻，管腔內(nèi)膜較光滑；高脂鉗夾各組的左頸總動脈隨鹽量增加，顏色逐漸發(fā)白，增粗明顯，管壁僵硬度隨鹽量增加而增加，內(nèi)膜可見白色條紋隆起。
　　 3、 HE光鏡觀察
　　 正常大鼠血管壁層次清晰，內(nèi)膜完整，內(nèi)皮細胞無脫落，平滑肌排列整齊；高脂正常鹽組10周末可見內(nèi)皮細胞損傷脫落，平滑肌排列紊亂，內(nèi)可見泡沫細胞；高脂6倍鹽組10周末可見內(nèi)膜增厚，突出的斑塊內(nèi)含有泡沫細胞，平滑肌

5、細胞減少，深部為壞死物質(zhì)；高脂12倍鹽組10周末可見內(nèi)膜明顯增厚，突出的斑塊內(nèi)含有大量的泡沫細胞，見較大鈣化灶，深部較多壞死物質(zhì)，形成典型粥樣硬化斑塊。
　　 4、透射電鏡觀察
　　 正常對照組大鼠內(nèi)皮細胞正常，血管內(nèi)膜光滑完整，中膜平滑肌排列整齊。其余組隨鹽量增加內(nèi)皮細胞脫落、中膜平滑肌細胞紊亂依次加重，6倍鹽及12倍鹽組出現(xiàn)斑塊改變。
　　 5、免疫組化觀察
　　 MMP-2和TIMP-2主要在內(nèi)膜內(nèi)

6、皮細胞、巨噬細胞、泡沫細胞的胞漿中表達，在正常對照組大鼠頸總動脈組織中低水平表達，在鉗夾高脂狀態(tài)下，各組大鼠頸總動脈組織中隨著鹽量表達水平升高，高于正常對照組(P<0.05)。
　　 6、RT-PCR觀察
　　 和正常對照組相比，鹽正常組、6倍鹽組、12倍鹽組，大鼠頸動脈的MMP-2和TIMP-2mRNA表達依次增強(P<0.05)。
　　 結論
　　 1.大鼠血壓和血脂隨鹽濃度增加而增高，表明在高脂狀態(tài)