多效生長因子、青娥丸加減對(duì)去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠治療療效的研究.pdf

1、文章內(nèi)容分為兩部分進(jìn)行闡述
　　第一部分 多效生長因子對(duì)去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠治療療效的研究
　　目的:近期研究表明多效生長因子（pleiotrophin，PTN）基因?qū)儆趧?dòng)力敏感性基因，機(jī)械應(yīng)力在其表達(dá)中起著非常關(guān)鍵性的作用，其活性產(chǎn)物PTN參與了骨細(xì)胞對(duì)機(jī)械應(yīng)力的應(yīng)答，對(duì)骨小梁構(gòu)像有可能起重要的作用。本實(shí)驗(yàn)建立大鼠骨質(zhì)疏松模型，通過骨密度、骨組織形態(tài)學(xué)參數(shù)、骨小梁三維重建結(jié)構(gòu)等指標(biāo)，初步評(píng)價(jià)80μg/Kg/d PTN對(duì)骨質(zhì)疏

2、松癥的治療療效。
　　方法:
　　(1)雌性SPF級(jí)4月齡SD大鼠12只，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后隨機(jī)分為以下4組:Ⅰ.假手術(shù)+氯化鈉組（SHAM組），Ⅱ.雙側(cè)卵巢切除+氯化鈉組（OVX組），Ⅲ.雙側(cè)卵巢切除+甲狀旁腺激素組（PTH組），Ⅳ.雙側(cè)卵巢切除+PTN組（PTN組），每組3只。水合氯醛0.3ml/Kg皮下注射麻醉，Ⅰ組切除與卵巢體積同樣大小的脂肪組織，其余各組切除雙側(cè)卵巢。
　　(2)各組于造模術(shù)后10周起，分別給予

3、以下處理:SHAM組和OVX組每日給予皮下注射PBS0.2ml/d， PTH組每日給予皮下注射PTH20μ g/Kg，PTN組每日給予皮下注射PTN80μg/Kg。
　　(3)術(shù)后21周處死大鼠。
　　(4)分離子宮，稱重。分離股骨，剝離軟組織。對(duì)股骨干骺端進(jìn)行顯微CT掃描，得到骨小梁三維重建圖像和以下參數(shù):骨密度(BMD)、骨小梁體積(BV)、骨小梁表面(BS)、全部骨組織體積(TV)、骨體積分?jǐn)?shù)(BV/TV)、骨表面積和

4、骨體積的比值(BS/BV)、骨表面積和組織體積的比值(BS/TV)、骨小梁數(shù)量(Tb.N)、骨小梁分離度(Tb.Sp)、骨小梁厚度(Tb.Th)、各向異性(DA)、結(jié)構(gòu)模型指數(shù)(SMI)、骨小梁模式因子(TBPf)。
　　結(jié)果:
　　(1)每組大鼠術(shù)前體重組間無顯著性差異(P＞0.05)。卵巢切除術(shù)后10周，SHAM組體重顯著低于其他各組(P＜0.05)。術(shù)后21周，SHAM組體重顯著低于其他各組(P＜0.05)，子宮重和子

5、宮重/體重顯著高于其他各組(P＜0.05)。
　　(2) SHAM組BMD、 BV/TV顯著高于OVX組（P＜0.01）。SHAM組TB.N、Tb.Th顯著高于OVX組(P＜0.01，P＜0.05)，Tb.Sp、SMI、TBPf顯著低于OVX組(P＜0.01)，DA低于OVX組，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　(3) OVX組BMD、BV/TV顯著低于PTN組、PTH組(P＜0.01，P＜0.05)。OVX組TB.N

6、顯著低于PTN組、PTH組(P＜0.01)，Tb.Sp、TBPf顯著高于PTN組(P＜0.05)和PTH組(P＜0.01)，DA高于PTN組、PTH組，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　(4) PTH組BMD、BV/TV顯著高于PTN組(P＜0.01)。PTH組TB.N、Tb.Th顯著高于PTN組(P＜0.01)，TBPf、SMI顯著低于PTN組(P＜0.01)，Tb.Sp、DA與PTN組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05

7、)。
　　(5)股骨骨小梁三維重建圖像顯示，SHAM組骨小梁排列整齊且緊密，骨小梁數(shù)量多。其他各組骨小梁數(shù)量減少，排列稀疏，間隙增大，某些部位出現(xiàn)骨小梁斷裂，但PTH組和PTN組骨小梁結(jié)構(gòu)的緊密性遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于OVX組。
　　結(jié)論:皮下注射PTN[80μg/(kg.d)]可有效增加去卵巢大鼠的骨量，改善骨小梁微結(jié)構(gòu)。
　　第二部分 青娥丸加減對(duì)去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠治療療效的研究
　　目的:青娥丸是治療骨質(zhì)疏松癥的經(jīng)典方劑

8、。本實(shí)驗(yàn)建立大鼠骨質(zhì)疏松模型，通過骨密度、骨組織形態(tài)學(xué)參數(shù)、骨小梁三維重建結(jié)構(gòu)等指標(biāo)，評(píng)價(jià)由杜仲、續(xù)斷、川牛膝、補(bǔ)骨脂、龍骨、當(dāng)歸和胡桃肉七味中藥組成的青娥丸加減方劑對(duì)骨質(zhì)疏松癥的治療療效。
　　方法:
　　(1)雌性SPF級(jí)4月齡SD大鼠12只，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后隨機(jī)分為以下4組:Ⅰ.假手術(shù)+氯化鈉組（SHAM組），Ⅱ.雙側(cè)卵巢切除+氯化鈉組（OVX組），Ⅲ.雙側(cè)卵巢切除+甲狀旁腺激素組（PTH組），Ⅳ.雙側(cè)卵巢切除+青娥丸

9、加減組（中藥組），每組3只。水合氯醛0.3ml/Kg皮下注射麻醉，Ⅰ組切除與卵巢體積同樣大小的脂肪組織，其余各組切除雙側(cè)卵巢。
　　(2)各組于造模術(shù)后10周起，分別給予以下處理:SHAM組和OVX組每日給予皮下注射PBS0.2ml/d，PTH組每日給予皮下注射PTH20μg/Kg，中藥組每日給予中藥藥劑0.9mg/Kg灌胃。
　　(3)術(shù)后21周處死大鼠。參照第一部分方法進(jìn)行分析。
　　結(jié)果:
　　(1)各組大

10、鼠術(shù)前體重組間無顯著性差異(P＞0.05)。卵巢切除術(shù)后10周，SHAM組體重顯著低于其他各組(P＜0.05)。術(shù)后21周，SHAM組體重顯著低于其他各組（P＜0.05），子宮重和子宮重/體重顯著高于其他各組(P＜0.05)。
　　(2)SHAM組BMD、 BV/TV顯著高于OVX組（P＜0.01）。SHAM組TB.N、Tb.Th顯著高于OVX組(P＜0.01，P＜0.05)，Tb.Sp、SMI、TBPf顯著低于OVX組（P＜0.

11、01），DA低于OVX組，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　(3)OVX組BMD、BV/TV顯著低于中藥組(P＜0.01，P＜0.05)。OVX組TB.N顯著低于中藥組(P＜0.01)，Tb.Sp、TBPf、 SMI顯著高于OVX組(P＜0.01，P＜0.05)，DA、Tb.Th低于中藥組，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　(4)PTH組BMD顯著高于中藥組(P＜0.05)，BV/TV高于中藥組，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

12、。PTH組Tb.Th顯著高于中藥組(P＜0.01)，SMI、TBPf顯著低于中藥組（P＜0.05，P＜0.01），TB.N高于中藥組，DA和Tb.Sp低于中藥組，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　(5)股骨骨小梁三維重建圖像顯示，SHAM組骨小梁排列整齊且緊密，骨小梁數(shù)量多。其他各組骨小梁數(shù)量減少，排列稀疏，間隙增大，某些部位出現(xiàn)骨小梁斷裂，但治療組骨小梁結(jié)構(gòu)的緊密性遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于OVX組。
　　結(jié)論:青蛾丸加減方劑有效增加