新型鉑類化合物Pt(0506)101的抗胃癌作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：胃癌(gastric cancer)是最常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤之一，近年來(lái)世界各國(guó)的胃癌發(fā)病率和病死率均顯著上升。順鉑、卡鉑等傳統(tǒng)鉑類藥物一直作為治療癌癥的經(jīng)典化療藥，但是其副作用和耐藥性問(wèn)題卻不容忽視，因此十分有必要研發(fā)新型鉑類替代藥物。Pt(0506)101是一種新合成的鉑類化合物，本文通過(guò)離體細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，初步研究和探討了Pt(0506)101的抗胃癌作用及機(jī)制。
　　方法：①整體（動(dòng)物）試驗(yàn):建立裸鼠MGC-

2、803人胃癌移植瘤模型，尾靜脈注射給藥，每4天給藥1次，共5次。氟尿嘧啶作為陽(yáng)性對(duì)照藥。每3天測(cè)量小鼠體重及腫瘤大小1次。給藥結(jié)束后拍照并取腫瘤稱重。②離體（細(xì)胞）試驗(yàn):采用MTT法檢測(cè)Pt(0506)101對(duì)兩種胃癌細(xì)胞的體外細(xì)胞毒作用，流式細(xì)胞儀檢測(cè)Pt(0506)101作用后的人胃癌細(xì)胞MGC-803的細(xì)胞周期、凋亡率的變化情況。③作用機(jī)制研究：在人胃癌MGC-803細(xì)胞中加入不同濃度的Pt(0506)101，并以氟尿嘧啶和卡鉑作

3、為陽(yáng)性對(duì)照藥，48 h后檢測(cè)凋亡蛋白以及信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)情況；用不同濃度Pt(0506)101處理MGC-803細(xì)胞24h，并以氟尿嘧啶和卡鉑作為陽(yáng)性對(duì)照藥，實(shí)時(shí)RT-PCR法檢測(cè)p53基因、TNF-α細(xì)胞因子的mRNA表達(dá)情況；用50μM濃度Pt(0506)101處理MGC-803細(xì)胞15min、30min、60min，用western blot測(cè)定JNK磷酸化水平，探究藥物激活/JNK通路時(shí)間情況。
　　結(jié)果：⑴整體試驗(yàn)結(jié)

4、果:Pt(0506)101-120mg/kg能抑制裸鼠人胃癌MGC-803移植瘤的生長(zhǎng)，且與0.5％GS對(duì)照組比較有顯著性差異，MGC-803的腫瘤抑制率為56.14％，效果好于陽(yáng)性對(duì)照藥5-FU（抑制率為25.56％）。⑵Pt(0506)101對(duì)SGC-7901、MGC-803等胃癌細(xì)胞株的細(xì)胞毒作用較強(qiáng)，作用不及順鉑，卻明顯強(qiáng)于對(duì)卡鉑，和氟尿嘧啶接近，且呈時(shí)間和劑量雙重依賴性。對(duì)人胃癌耐藥株SGC-7901/DDP較順鉑敏感，提示P

5、t(0506)101可能對(duì)某些已經(jīng)耐藥的腫瘤細(xì)胞株能起到顯著的殺傷效果。⑶Pt(0506)101預(yù)處理MGC-803胃癌細(xì)胞48 h，能顯著地呈劑量依賴促進(jìn)細(xì)胞發(fā)生凋亡(P＜0.01)，其效果遠(yuǎn)好于5μM順鉑和50μM卡鉑。3)Pt(0506)101能誘導(dǎo)人胃癌細(xì)胞周期的改變，減少G1期細(xì)胞的比例，同時(shí)增加S期細(xì)胞比例。提示Pt(0506)101可能是通過(guò)對(duì)MGC-803阻滯在細(xì)胞S期來(lái)抑制細(xì)胞增殖，進(jìn)而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。⑷Pt(0506)

6、101呈濃度依賴上調(diào)抑癌蛋白Bax的表達(dá)，下調(diào)促癌蛋白Bcl-2的表達(dá)，顯著性地提高Bax/Bcl-2的比例。⑸Pt(0506)101能顯著上調(diào)p53抑癌基因mRNA轉(zhuǎn)錄水平。3）Pt(0506)101能激活MAPK通路JNK磷酸化蛋白表達(dá)，且給藥刺激15min后磷酸化水平上升，30min后達(dá)到高峰，60 min后減少，而總JNK蛋白的含量無(wú)明顯改變，提示/JNK的激活可能早于細(xì)胞凋亡(24h)。
　　結(jié)論：綜上所述，Pt(050