紅景天聯(lián)合布地奈德對哮喘小鼠氣道炎癥和氣道重塑影響的研究.pdf

1、目的:采用卵清蛋白(VOA)致敏及激發(fā)復制小鼠哮喘模型，觀察紅景天聯(lián)合糖皮質(zhì)激素對哮喘小鼠肺組織中白介素-4(IL-4)、γ-干擾素(IFN-γ)、轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)、一氧化氮(NO)、總抗氧化能力(T-AOC)的表達和氣道膠原沉積面積的影響，探討紅景天聯(lián)合糖皮質(zhì)激素對哮喘小鼠氣道炎癥、氣道重塑和氧化應激的調(diào)控作用及機制。
　　方法:56只C57bL/6小鼠隨機分成對照組（A組）、哮喘組（B組）、布地奈德組（C組）、

2、紅景天低劑量組（D組）、紅景天高劑量組（E組）、低劑量紅景天聯(lián)合布地奈德組（F組）、高劑量紅景天聯(lián)合布地奈德組（G組），每組8只。采用VOA致敏及激發(fā)復制哮喘模型，霧化吸入布地奈德和低、高劑量紅景天灌胃干預。觀察小鼠臨床表現(xiàn)特點，劉氏染色法分類計數(shù)支氣管肺泡灌洗液(BALF)中細胞數(shù)，雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測BALF中IL-4、IFN-γ和TGF-β1的濃度，HE染色和masson染色觀察氣道炎癥及氣道膠原沉積面積，免

3、疫組化法檢測肺組織中TGF-β1、IL-4和IFN-γ的表達，總NO檢測試劑盒檢測肺組織中NO活性，T-AOC檢測試劑盒(ABTS)檢測肺組織中T-AOC含量。結(jié)果:1.BALF細胞總數(shù)及其分類計數(shù)的結(jié)果:B組BALF中細胞總數(shù)及嗜酸性粒細胞計數(shù)較A組明顯升高（P＜0.05）;C組、D組、E組、F組和G組BALF中細胞總數(shù)及嗜酸性粒細胞計數(shù)較B組明顯下降，且高劑量組與低劑量組相比較降低明顯，差異具有統(tǒng)計學意義(P均＜0.05)，G組細胞

4、總數(shù)及嗜酸性粒細胞計數(shù)降低最為顯著。2.BALF中IL-4、TGF-β1、IFN-γ結(jié)果:B組IL-4、TGF-β1（259.16±4.27，160.49±6.41）的水平較A組（27.46±5.82，59.32±7.39）明顯增高(P＜0.05)，而B組IFN-γ的水平（72.53±9.43）較A組（187.94±10.54）顯著降低(P＜0.05);經(jīng)紅景天及布地奈德干預后，BALF中IL-4、TGF-β1在C組(84.14±5.2

5、1，97.86±5.37)、D組(147.53±3.59，113.13±6.28)、E組(135.36±3.34，104.27±5.14)、F組（78.38±6.04，91.32±7.03）和G組（73.14±2.93，85.24±7.08）中的水平較B組明顯降低，G組降低最明顯，差異具有統(tǒng)計學意義（P均＜0.05），而IFN-γ在C組（122.58±12.61）、D組(92.7±11.39)、E組（103.4±9.72）、F組（126

6、.37±10.39）和G組（130.29±8.22）中的水平較B組則明顯升高，G組升高最明顯，差異具有統(tǒng)計學意義(P均＜0.05)。3.(1) HE染色:B組可見大量炎癥細胞浸潤，A組無明顯炎癥改變，經(jīng)紅景天及布地奈德干預后，C組、D組、E組、F組和G組炎癥細胞浸潤明顯減少，以G組減少最明顯;(2) Masson染色:B組可見大量膠原沉積，Wcol/ Pbm（32.8±5.1）較A組（5.4±1.3）明顯增高(P＜0.05)，經(jīng)紅景天及

7、布地奈德干預后，C組(10.7±2.5)、D組（11.9±2.6）、E組（11.0±2.4）、F組（9.9±3.2）和G組（8.7±1.9）中Wcol/Pbm較B組明顯降低，以G組減輕最為明顯，差異具有統(tǒng)計學意義(P均＜0.05)。4.支氣管肺組織免疫組化IL-4、TGF-β1、IFN-γ的表達: B組IL-4、TGF-β1(0.335±0.017，0.417±0.008)的水平較A組(0.039±0.006，0.168±0.003)明

8、顯增高(P＜0.05)，而B組IFN-γ的水平（0.093±0.009）較A組（0.314±0.027）顯著降低(P＜0.05);經(jīng)紅景天及布地奈德干預后，BALF中IL-4、TGF-β1在C組(0.130±0.003，0.238±0.004)、D組(0.156±0.009，0.298±0.017)、E組(0.143±0.005，0.271±0.013)、F組(0.126±0.013，0.227±0.015)和G組(0.114±0.00

9、2，0.213±0.009)中的水平較B組明顯降低（P均＜0.05），而IFN-γ在C組（0.276±0.005）、D組（0.238±0.012）、E組（0.249±0.004）、F組(0.282±0.014)和G組（0.288±0.003）的水平較B組明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P均＜0.05）。5.肺組織中NO和T-AOC的含量:與A組(0.328±0.124，1.030±0.021)相比，B組（1.235±0.084，0.475

10、±0.023）肺組織中NO的含量顯著升高，T-AOC的含量明顯降低（P＜0.05）;經(jīng)干預后與B組相比，C組（0.764±0.007，0.750±0.106）、D組(0.892±0.156，0.502±0.202)、E組(0.813±0.005，0.580±0.219)、F組(0.715±0.016，0.780±0.061)和G組（0.669±0.172，0.803±0.110）肺組織中NO的表達明顯降低，T-AOC明顯升高，差異具有統(tǒng)

11、計學意義(P均＜0.05)。
　　結(jié)論:1.OVA致敏及激發(fā)可成功構(gòu)建小鼠哮喘模型。2.紅景天和布地奈德干預治療均可抑制哮喘小鼠肺組織中IL-4、TGF-β1、NO的水平并增加IFN-γ、T-AOC的表達，但以布地奈德作用更明顯。3.紅景天能夠抑制氣道炎癥和氣道重塑，具有抗氧化作用，且存在劑量依賴關(guān)系。4.紅景天和布地奈德聯(lián)合用藥具有協(xié)同作用，其機制可能是通過調(diào)節(jié)IL-4/IFN-γ、 NO/T-AOC失衡，抑制TGF-β1的表達