3-溴丙酮酸阻斷肝癌能量代謝的介入治療及其療效評價的實驗研究.pdf

1、本文分三個部分進行探討：
　　第一部分:3-溴丙酮酸抗Walker256腫瘤細胞作用的體外實驗研究
　　目的：體外檢測3-溴丙酮酸對Walker256細胞的抗腫瘤活性。
　　方法：體外采用噻唑藍(MTT)比色法檢測3-溴丙酮酸對Walker256細胞的抗腫瘤活性，瓊脂糖凝膠電泳實驗檢測腫瘤細胞凋亡。
　　結(jié)果：1、5、10、25、50umol/L3-溴丙酮酸對Walker256細胞抑制率分別為（10.9±0.9）

2、％、（18.5±1.7）％、（24.2±1.3）％、（40.4±3.0）％、（55.1±2.4）％，3-溴丙酮酸對Walker256細胞的IC50濃度為40.26umol/l，50umol/L3-溴丙酮酸處理Walker256細胞72h后DNA凝膠電泳出現(xiàn)明顯的梯狀條帶，陰性對照組Walker256細胞凝膠電泳后無梯狀條帶。
　　結(jié)論：腫瘤能量阻斷劑3-溴丙酮酸在體外對肝癌細胞有較強的抗腫瘤作用。
　　第二部分:3-溴丙酮酸

3、對大鼠肝癌模型介入治療的體內(nèi)實驗研究
　　目的：體內(nèi)研究經(jīng)肝動脈灌注3-溴丙酮酸對大鼠肝癌治療作用，并探討其對腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移能力的影響。
　　方法：30只雄性Wistar用于建立肝癌模型，種植術(shù)后11天行胃十二指腸動脈逆行插管動脈灌注治療，隨機分為動脈灌注3-溴丙酮酸組（A組）、絲裂霉素+碘油栓塞組（B組）和生理鹽水組（C組），介入術(shù)后第3天完成MRI檢測后處死Wistar大鼠，病理檢查腫瘤壞死率及免疫組織化學(xué)方法檢測腫瘤組

4、織PCNA、VEGF和MMP9表達。
　　結(jié)果：腫瘤壞死率：A組7例Ⅲ級壞死，2例Ⅳ級壞死和1例Ⅰ級壞死，B組5例Ⅲ級壞死和1例Ⅱ級壞死，C組6例均為Ⅰ級壞死，治療后A、B組腫瘤平均壞死率明顯高于C組，腫瘤壞死率有統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.001,P=0.001），A、B組間腫瘤壞死率無統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.927）；免疫組織化學(xué)檢查VEGF：A組腫瘤中心9例VEGF陰性，1例Ⅱ級表達，A組癌旁9例VEGFⅠ級和1例Ⅱ級表達；B組腫瘤中心

5、4例VEGF陰性，2例Ⅰ級表達，B組癌旁5例VEGFⅡ級和1例Ⅰ級表達；C組腫瘤中心6例均為Ⅱ級表達，癌旁組織均為Ⅱ級表達。C組與A、B組腫瘤中心VEGF表達有統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.001，P=0.002），A、B組間腫瘤中心VEGF表達無統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.339）；A組與B、C組間癌旁VEGF存在統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.005，P=0.001），B、C組間癌旁VEGF無統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.317）；免疫組化檢查MMP9：A組腫瘤中心7例M

6、MP9陰性，1例Ⅱ級表達，2例Ⅰ級表達，A組癌旁8例MMP9Ⅰ級和2例陰性表達；B組腫瘤中心4例為MMP9陰性，2例為Ⅰ級表達，B組癌旁6例為MMP9Ⅰ級表達；C組腫瘤中心5例MMP9Ⅱ級表達和1例Ⅰ級表達，癌旁組織均為MMP9Ⅱ級。A、B組間腫瘤中心MMP9表達無統(tǒng)計學(xué)差異（P=1.000），C組與A、B組腫瘤中心MMP9表達有統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.003， P=0.004）；A、B組間腫瘤癌旁組織MMP9表達無統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.25

7、7），C組與A、B組間腫瘤癌旁組織MMP9表達有統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.002，P=0.005）。
　　結(jié)論：3-溴丙酮酸在體內(nèi)對大鼠肝癌模型有較強的抗腫瘤作用；3-溴丙酮酸能降低腫瘤組織和癌旁組織VEGF和MMP9表達。
　　第三部分:彌散加權(quán)成像對3-溴丙酮酸介入治療大鼠肝癌早期療效評價的價值
　　目的：探討彌散加權(quán)成像（diffusion-weighted inaging, DWI）對腫瘤能量阻斷劑3-溴丙酮酸介入治

8、療Wistar大鼠Walker256肝癌模型早期療效評價。
　　方法：實驗二部分30只肝癌模型大鼠，按照第二部分方法分為A、B、C三組，介入治療術(shù)前1天及術(shù)后第3天進行磁共振檢查包括彌散加權(quán)成像。在MRI圖像上測量腫瘤最大直徑、腫瘤體積和腫瘤表觀擴散系數(shù)（apparent diffusion coefficient, ADC），并與病理學(xué)結(jié)果對照。
　　結(jié)果：介入治療術(shù)前1天 A、B、C組腫瘤最大直徑分別為9.53±2.48

9、mm、7.35±3.61mm、4.51±3.08mm，介入術(shù)后第3天 A、B、C組腫瘤最大直徑分別為15.20±2.76mm、10.48±2.01mm、10.13±4.03mm，介入治療后 A、B、C組腫瘤最大直徑各組間無統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.795，P=0.630，P=0.842）；介入治療術(shù)前1天A、B、C組腫瘤體積分別為305.48±62.47 mm3、439.62±196.58mm3、137.93±93.93 mm3，介入治療后第

10、3天A、B、C組腫瘤體積分別為482.98±103.88 mm3、569.79±268.89 mm3、432.44±437.39 mm3，治療后A與 B、C組腫瘤體積無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.781, P=0.638)；介入治療術(shù)前1天A、B、C組ADC值分別為(8.37±1.77)×10-4 s/mm2、(7.59±0.96)×10-4s/mm2、(6.97±1.51)×10-4s/mm2,介入治療后第3天A、B、C組的ADC值分別為(1