3-溴丙酮酸對(duì)SMMC-7721和H22肝癌細(xì)胞的作用研究.pdf

1、第一部分3-溴丙酮酸抗SMMC-7721肝癌細(xì)胞增殖的研究 目的：觀察3-溴丙酮酸(3-Bromopyruvate，3-BrPA)對(duì)SMMC-7721肝癌細(xì)胞的增殖抑制作用，并探尋最佳作用濃度。 方法：將體外培養(yǎng)的SMMC-7721肝癌細(xì)胞常規(guī)傳代后，加新鮮配制的3-BrPA溶液，MTT法觀察SMMC-7721細(xì)胞在不同濃度3-BrPA和不同時(shí)間點(diǎn)的增殖抑制情況；倒置光顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化；電鏡觀察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)改變；H

2、oechst33342/PI雙熒光活染方法觀察3-BrPA對(duì)細(xì)胞的作用形式。 結(jié)果：(1)MTT結(jié)果顯示3-BrPA對(duì)SMMC-7721肝癌細(xì)胞有很強(qiáng)的抑制作用，在濃度是0.75mmol/l時(shí)抑制作用最強(qiáng)；(2)相差顯微鏡下觀察細(xì)胞經(jīng)3-BrPA處理后胞體縮小、變圓，貼壁能力下降；(3)熒光染色結(jié)果表明細(xì)胞經(jīng)3-BrPA處理后，多為染成紅色的壞死細(xì)胞；(4)電鏡下觀察細(xì)胞經(jīng)3-BrPA作用后，染色質(zhì)分散，可見(jiàn)少量凝聚的核染色質(zhì)，

3、細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)變化不明顯。 結(jié)論：3-BrPA對(duì)SMMC-7721肝癌細(xì)胞有很強(qiáng)的增殖抑制作用，在0.75mmol/l時(shí)抑制作用最強(qiáng)。 第二部分3-溴丙酮酸對(duì)小鼠H22肝癌的抑制作用研究 目的：觀察不同給藥方式的3-BrPA對(duì)小鼠H22肝癌的抑制作用，并初步探討3-BrPA的作用機(jī)理。 方法：將經(jīng)小鼠腹腔傳代的H22細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度為1×107/ml，接種在ICR小鼠腹股溝后，將0.75mmol/l3-B

4、rPA按0.013ml/g/隔日以腹腔、灌胃和局部給藥三種不同的給藥方式作用于H22小鼠，連續(xù)一周后停藥，觀察給藥前后小鼠的體重，瘤重，抑瘤率，瘤組織的壞死面積，瘤組織的HK活性，以及肝臟，腎臟和心臟的病理切片和生化檢測(cè)。 結(jié)果：(1)各種給藥方式給藥前后小鼠體重?zé)o變化；(2)經(jīng)腹腔和局部給藥組中實(shí)驗(yàn)組的瘤重均明顯低于相應(yīng)的對(duì)照組；(3)局部組和腹腔組中實(shí)驗(yàn)組的HK活性均明顯低于相應(yīng)的對(duì)照組；(4)局部組和腹腔組中實(shí)驗(yàn)組的壞死面