2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè),還剩93頁(yè)未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、第一部分:大鼠胃黏膜上皮氧化應(yīng)激狀態(tài)的建立及機(jī)制。
  研究背景:
  大量飲酒與胃腸道疾病相關(guān),長(zhǎng)期適量飲酒對(duì)胃腸道的影響尚待研究。
  高濃度乙醇對(duì)胃黏膜損害的動(dòng)物模型較為容易建立,長(zhǎng)期適量乙醇攝入對(duì)胃黏膜的影響的動(dòng)物模型鮮有報(bào)道。
  Benjiamin Taylor[7]通過(guò)系統(tǒng)性回顧研究對(duì)于長(zhǎng)期適度飲酒對(duì)胃腸的作用和影響得出結(jié)論:適量的乙醇攝入對(duì)于疾病發(fā)展起消極、積極的作用,總得來(lái)說(shuō)適量乙醇攝入不是胃腸

2、疾病發(fā)展的高危因素。Taylor B把適量飲酒定義為每天乙醇攝入約為10-40g/d,據(jù)此我們給予Wistar大鼠乙醇15%(V/V)1ml/d灌胃,相對(duì)于適量攝入乙醇量。
  流行病學(xué)研究[8]表明適量飲酒是肝病、食管腫瘤、胰腺炎的危險(xiǎn)因素,但是對(duì)于慢性胃炎、膽囊結(jié)石卻有積極意義,機(jī)制并不明確。人體中95%左右乙醇分解是通過(guò)氧化途徑進(jìn)行,包括乙醇的首過(guò)代謝(first-pass metabolism,F(xiàn)PM),微粒體乙醇氧化體系

3、(microsomal ethanol-oxidizing system,MEOS),脂肪酸過(guò)氧化氫酶(catalase),乙醛脫氫酶(aldehydede hydrogenase,ALDH)[9]。乙醇首過(guò)代謝[10]是指一定量的乙醇攝入后進(jìn)入系統(tǒng)循環(huán)之前在胃和肝中代謝。Lieber[11]等廣泛的研究了這種現(xiàn)象,他們提出FPM主要發(fā)生在胃組織,胃黏膜乙醇脫氫酶起重要作用。ADH和ALDH途徑是乙醇代謝的主要途徑,ADH介導(dǎo)乙醇氧化,

4、使底物乙醇上的氫轉(zhuǎn)移到輔酶NAD上,轉(zhuǎn)化為NADH,產(chǎn)生底物乙醛。乙醛利用輔酶NAD在ALDH作用下轉(zhuǎn)化為乙酸,產(chǎn)生NADH。乙酸轉(zhuǎn)化為乙酰輔酶A,進(jìn)入三羧酸循環(huán),最終分解為二氧化碳和水。
  隨著酒精攝入量的增加和蓄積微粒體乙醇氧化系統(tǒng)參與乙醇氧化代謝,活性氧(reactive oxygen species,ROS)、氧自由基(oxygen free radical,OFR)隨之產(chǎn)生,包括線粒體在內(nèi)的細(xì)胞膜性系統(tǒng)出現(xiàn)脂質(zhì)過(guò)氧化,

5、細(xì)胞進(jìn)入氧化應(yīng)激(oxidative stress,OS)狀態(tài)[12],轉(zhuǎn)錄因子缺氧誘導(dǎo)因子-1a表達(dá)增加,從而引起細(xì)胞處于乏氧適應(yīng)狀態(tài),以及新的功能。而免疫功能也會(huì)發(fā)生改變,以適應(yīng)細(xì)胞內(nèi)低氧的環(huán)境。
  1992年,Semenza,Wang首先發(fā)現(xiàn)了HIF1蛋白。HIF1是異源二聚體蛋白,由HIF1-α和HIF1-β組成,在缺氧條件下HIF1α迅速表達(dá)。一旦激活,HIF1α加強(qiáng)基因轉(zhuǎn)錄,包括幾乎所有的參與糖酵解的酶,增強(qiáng)細(xì)胞糖酵

6、解能力[13]。HIF1α激活丙酮酸脫氫酶激酶,抑制線粒體丙酮酸脫氫酶復(fù)合體,減少進(jìn)入三羧酸循環(huán)的丙酮酸量。進(jìn)入三羧酸循環(huán)的丙酮酸減少,減少缺氧狀態(tài)下氧化磷酸化及氧耗量。
  HIF1α參與免疫的調(diào)節(jié)。
  胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)源于細(xì)胞上皮的一種淋巴因子,可以直接作用于黏膜中樹(shù)突細(xì)胞(dendritic cells,DCs)[14,15]。使后者分泌OX

7、40L促使TH0細(xì)胞向TH2細(xì)胞極化,形成TH2免疫。
  正常胃黏膜上皮中存在DCs。TSLP是抗炎因子。
  TSLP是否在正常胃黏膜中表達(dá),尚未有研究。
  目的與方法:
  我們研究長(zhǎng)期乙醇攝入后大鼠胃黏膜病理形態(tài)變化,胃黏膜丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量變化及胃黏膜損傷程度,探討胃黏膜上皮細(xì)胞在缺氧狀態(tài)下,脂質(zhì)過(guò)氧化與上皮損傷的關(guān)系。我們分別用15%、30%、45%不同濃度乙醇灌胃

8、制備胃黏膜上皮氧化狀態(tài)模型,觀察胃黏膜大體及鏡下形態(tài)學(xué)變化并評(píng)估黏膜損傷指數(shù)(lesion index,LI),硫代巴比妥酸法(thiobarbituric acid,TBA)測(cè)定胃黏膜內(nèi)MDA含量,MDA與LI、病理?yè)p傷積分的關(guān)系。
  結(jié)果:
  我們發(fā)現(xiàn)(1)15%乙醇攝入組,3、6、9周后黏膜損傷指數(shù)、病理?yè)p傷積分、及MDA數(shù)量分別與對(duì)照組相比,均沒(méi)有顯著變化。(P>0.05,n=9)(2)30%、45%組胃黏膜損傷

9、指數(shù)與胃黏膜MDA含量呈正相關(guān),隨著乙醇濃度的升高及作用時(shí)間的延長(zhǎng),胃黏膜MDA含量增加,胃黏膜損傷程度加重(p<0.01,n=9)。
  結(jié)論:
  對(duì)于大鼠5ml/kg/d15%v/v乙醇攝入后,大鼠胃黏膜上皮細(xì)胞氧化應(yīng)激狀態(tài)不明顯。
  隨著濃度升高、攝入時(shí)間延長(zhǎng),長(zhǎng)期乙醇攝入可引起胃黏膜上皮細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化,細(xì)胞整體上處于缺氧狀態(tài)。
  第二部分:氧化應(yīng)激狀態(tài)下大鼠胃黏膜上皮細(xì)胞免疫因子表達(dá)的研究。

10、  研究背景:
  細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)代謝與細(xì)胞免疫是細(xì)胞內(nèi)兩種不同的功能。乙醇在胃黏膜上皮細(xì)胞代謝后是否能夠影響胃黏膜上皮細(xì)胞的功能,尚未有研究。
  乙醇與胃黏膜的關(guān)系主要集中于損傷與修復(fù)的關(guān)系。
  長(zhǎng)期乙醇攝入經(jīng)過(guò)胃黏膜上皮的首過(guò)代謝作用、微粒體乙醇氧化系統(tǒng)作用,胃黏膜上皮細(xì)胞細(xì)胞膜出現(xiàn)脂質(zhì)過(guò)氧化及大量活性氧產(chǎn)生,細(xì)胞內(nèi)固有還原劑NADPH減少,細(xì)胞為適應(yīng)常氧到缺氧環(huán)境的變化,轉(zhuǎn)錄因子缺氧誘導(dǎo)因子-1alpha(HIF

11、-1α)功能增強(qiáng),增強(qiáng)細(xì)胞缺氧耐受。HIF-1α是1992年發(fā)現(xiàn)的一種重要轉(zhuǎn)綠因子,HIF-1α的下游靶基因目前有超過(guò)200個(gè),參與能量代謝、血管新生、一氧化氮合成、鐵與血紅素代謝以及免疫調(diào)節(jié)[27]。胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)是一種上皮細(xì)胞來(lái)源的細(xì)胞因子,作用于髓樣和淋巴樣樹(shù)突細(xì)胞,調(diào)節(jié)適應(yīng)性免疫,在起始和促進(jìn)Th2細(xì)胞免疫過(guò)程中起重要作用。TSLP與樹(shù)突細(xì)胞上TSLP

12、R直接作用,通過(guò)CD40L促使Th0極化為Th2細(xì)胞,形成體液免疫,參與對(duì)胞外菌及寄生蟲清除。其激活途徑是獨(dú)立于MCHII分子、共刺激分子之外的另一條途徑。TSLP是否在胃黏膜上皮中表達(dá),以及其表達(dá)的機(jī)制尚未有人研究。我們?cè)O(shè)想在長(zhǎng)期乙醇攝入條件下HIF-1α被激活,其靶基因TSLP表達(dá)。豐富黏膜免疫理論,為適量飲酒可以有助于清除幽門螺旋桿菌(Helicobacter pylori,HP)提供理論支持。
  目的:
  1.建

13、立適量飲酒的大鼠動(dòng)物模型。
  2.大鼠胃胃黏膜上皮能否表達(dá)TSLP,以及表達(dá)量是否與攝入乙醇量、時(shí)間有關(guān)系。
  3.轉(zhuǎn)錄因子HIF-1α是否調(diào)控TSLP表達(dá)。
  材料與方法:
  選用健康雄性Wistar大鼠33只,按照不同濃度分為3組,分別給予生理鹽水、15%、45%乙醇灌胃,8%水合氯醛1ml麻醉后給予取出胃黏膜,用RT-PCR檢查各組HIF-1α、TSLPmRNA相對(duì)表達(dá)量,免疫組化進(jìn)行蛋白定位,We

14、sternblot技術(shù)測(cè)定細(xì)胞內(nèi)HIF-1α、TSLP表達(dá)量并進(jìn)行相關(guān)性分析。
  統(tǒng)計(jì)方法:
  SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用單因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,以P<0.05為顯著性差異。
  實(shí)驗(yàn)結(jié)果
  生理鹽水組大鼠胃黏膜mRNA水平檢測(cè)到HIF-1α,未檢測(cè)到TSLP。蛋白質(zhì)水平未檢測(cè)到HIF-1a、TSLP。15%,45%組mRNA水平、蛋白質(zhì)水平均有HIF-1α、TSL

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論