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文檔簡介
1、目的:
通過建立支氣管哮喘大鼠模型,觀察椒目油對哮喘大鼠氣道黏液高分泌過程中杯狀細(xì)胞(goblet cell,GC)數(shù)量、表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)表達(dá)及血清中IL-13、IL-4水平的影響,從而探討其對哮喘大鼠氣道黏液高分泌作用的機(jī)制。
方法:
?、龠x取清潔級(jí)雄性SD大鼠32只,體重200±20g,隨機(jī)分成4組:空白對照組、模型對照組(簡稱
2、模型組)、強(qiáng)的松陽性對照組(簡稱強(qiáng)的松組)、椒目油治療組(簡稱椒目油組),每組各8只。
?、谟趯?shí)驗(yàn)第1天、第8天取0.1%卵白蛋白氫氧化鋁凝膠混懸液1mL致敏大鼠,采取多點(diǎn)注射方式:腹腔0.4ml,兩后足跖皮下各0.05ml,雙腹股溝皮下各0.05ml,雙側(cè)胸部,頸部及背部皮下各0.1ml??瞻讓φ战M以生理鹽水代替OVA注射。
?、鄣?3天起開始灌胃,一日一次,連續(xù)5天,空白對照組和模型組予生理鹽水10ml/kg/d;強(qiáng)
3、的松組予強(qiáng)的松10mg/kg/d;椒目油組予椒目油751.9mg/kg/d。
?、苡诘?5、16、17天給藥一小時(shí)后,將各組大鼠分別置于30×40×40cm3大小的玻璃容器中,以1%OVA生理鹽水溶液霧化攻擊20分鐘,誘發(fā)哮喘,空白對照組以生理鹽水代替OVA霧化,各組大鼠于霧化攻擊48小時(shí)后處死。
?、菅咫x心處理后取上清液酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定IL-13、IL-4水平。
?、抻曳谓M織行蘇木素-伊紅(h
4、ematoxylin-eosin,HE)染色觀察一般病理表現(xiàn)、阿爾辛藍(lán)-過碘酸雪夫氏(alcian blue-periodic acid-schiff,AB-PAS)染色觀察杯狀細(xì)胞及免疫組化檢測EGFR表達(dá)。
?、卟捎肧PSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。
結(jié)果:
椒目油組和強(qiáng)的松組血清IL-13、IL-4水平和杯狀細(xì)胞比值與模型組相比均有不同程度降低(P<0.01或P<0.05);兩組大鼠氣道上
5、皮細(xì)胞胞漿 EGFR表達(dá)平均光密度與模型組比較其差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05);肺組織病理圖片顯示椒目油組和強(qiáng)的松組大鼠氣道炎癥及杯狀細(xì)胞增生和(或)化生較模型組均明顯減輕,杯狀細(xì)胞增生和(或)化生僅存在于大氣道,未見黏液潴留。
結(jié)論:
椒目油對哮喘大鼠氣道黏液高分泌具有一定的干預(yù)作用,其可能機(jī)制為:椒目油通過降低哮喘大鼠血清IL-13、IL-4水平,減輕氣道炎癥,抑制杯狀細(xì)胞增生和(或) 化生,減少
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