人參及鹿茸蛋白的分離純化.pdf

1、目的：針對人參及鹿茸中含量較高的蛋白質(zhì)，摸索建立一條快速、簡單、高效的人參鹿茸蛋白純化工藝路線，為日后人參、鹿茸蛋白的結(jié)構(gòu)與功能研究和新藥開發(fā)打下基礎(chǔ)。
　　方法：采用中性緩沖液抽提和硫酸銨分級沉淀法提取總蛋白，應(yīng)用超濾，親和層析、離子交換層析、疏水層析、凝膠過濾層析等現(xiàn)代生物技術(shù)進行分離、純化；經(jīng)SDS-PAGE電泳和高效凝膠過濾色譜對所純化蛋白進行鑒定。
　　結(jié)果：
　　1、本文建立了動植物蛋白的分離純化工藝路線和

2、方法，并在人參和鹿茸中分離純化了9種電泳和高效液相純度的蛋白成分。其中，從人參中分離純化出5種蛋白質(zhì)，從鹿茸中分離純化出4種蛋白質(zhì)。
　　2、從鹿茸中純化的蛋白的收率都在75％以上；從人參中純化的蛋白除 GP1和 GP2以外，收率都在80％以上。
　　3、人參蛋白 GP1為單亞基蛋白，分子量為25kDa；GP2為單亞基蛋白，分子量為65kDa；GP3為單亞基蛋白，分子量為15kDa；GP4為糖蛋白，分子量為66kDa。包含兩

3、個亞基分子量分別為29kDa和27kDa；GP5為單亞基蛋白，分子量為8kDa；
　　4、鹿茸蛋白DAP-1為異源四聚體，分子量為140kD。包含兩個亞基分子量分別為50kDa和27kDa；DAP-2為同源二聚體，分子量為120kDa。亞基分子量為64kDa；DAP-3為同源二聚體，分子量為28kDa。亞基分子量為13kDa；DAP-4為單亞基蛋白，分子量為6kDa。
　　5、9種蛋白中，GP1為類RNA酶，GP3為殼多糖酶

4、樣蛋白，GP4為人參核糖核酸酶；2種人參蛋白GP2和GP5以及4種鹿茸蛋白DAP-1、DAP-2、DAP-3和DAP-4，均為首次報道,其性質(zhì)有待于進一步研究。
　　結(jié)論：本研究針對兩種重要中藥材－人參、鹿茸，以藥材中的含量較高的大分子蛋白質(zhì)成分為研究對象，采用先進的生物技術(shù)，建立了分離純化路線和方法，并分離純化出9種蛋白。本文所建立的分離純化技術(shù)路線和方法克服了以往同類研究中所存在的技術(shù)水平較低，工藝不合理、收率較低、純度不高的