妊娠期高糖飲食對(duì)子代學(xué)習(xí)記憶及海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、本文分析了妊娠期高糖飲食對(duì)子代學(xué)習(xí)記憶及海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響。本研究分為兩個(gè)部分：
　　第一部分：
　　目的：妊娠期高糖飲食不利于胎兒及子代的正常生長(zhǎng)和器官發(fā)育,并可能引起一定的功能改變。本實(shí)驗(yàn)著眼于研究妊娠期高糖飲食對(duì)子代腦發(fā)育的影響,并進(jìn)一步探究其子代腦功能,如學(xué)習(xí)記憶能力是否改變。
　　方法：采用本實(shí)驗(yàn)室已建立成熟的妊娠期高糖飲食模型,將懷孕母鼠隨機(jī)分為妊娠期高糖飲食組(高糖組,HS)和正常飲食組(對(duì)照組,C)

2、。高糖組母鼠妊娠期全程(第1-21天)給予20％蔗糖水和正常標(biāo)準(zhǔn)飼料,對(duì)照組母鼠妊娠期全程給予正常飼料和淡水。出生后子代鼠均給予標(biāo)準(zhǔn)化飼料和淡水。監(jiān)測(cè)孕鼠在妊娠期的飲水飲食及體重變化;于妊娠第21天檢測(cè)孕鼠空腹血糖、羊水含糖量及胎鼠血糖,子代大鼠標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng),檢測(cè)1月齡及2月齡大鼠空腹血糖;分別稱量胎鼠、1月齡及2月齡子代鼠的體重、腦重,并計(jì)算腦/體重比值;采用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)1月齡及2月齡子代大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力。
　

3、　結(jié)果：高糖組母鼠在妊娠期的飲水飲食及體重增長(zhǎng)與對(duì)照組相比均無(wú)明顯差異;妊娠第21天,高糖組孕鼠的空腹血糖顯著高于對(duì)照組,羊水含糖量在兩組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,高糖組胎鼠、1月齡及2月齡子代鼠的空腹血糖均顯著高于對(duì)照組;高糖組2月齡子代鼠腦重顯著下降,胎鼠、1月齡及2月齡子代鼠的腦/體重比值均顯著低于對(duì)照組,而體重均顯著升高;Morris水迷宮訓(xùn)練結(jié)果顯示,暴露于妊娠期高糖飲食的子代大鼠在定位航行實(shí)驗(yàn)中需要更長(zhǎng)的時(shí)間和游更長(zhǎng)的距離才能找到平臺(tái)

4、,兩組大鼠在空間搜索實(shí)驗(yàn)中的穿越平臺(tái)次數(shù)及目標(biāo)象限停留時(shí)間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論：妊娠期高糖飲食對(duì)胎兒及子代的生長(zhǎng)和腦發(fā)育具有一定影響,該影響在子代中可表現(xiàn)為學(xué)習(xí)記憶能力的下降。
　　第二部分：
　　目的：通過(guò)組織學(xué)及分子生物學(xué)手段,研究妊娠期高糖飲食對(duì)子代海馬腦區(qū)神經(jīng)元凋亡的影響,并進(jìn)一步探究其可能的機(jī)制。
　　方法：妊娠期高糖飲食模型的建立同第一部分;取2月齡子代大鼠的新鮮腦組織進(jìn)行冰凍切片,采用一步法T

5、UNEL染色檢測(cè)兩組大鼠海馬腦區(qū)(CA1,CA2, CA3)的細(xì)胞凋亡,并于熒光顯微鏡下記錄兩組切片陽(yáng)性染色細(xì)胞數(shù);以Western blotting法檢測(cè)兩組2月齡子代大鼠海馬組織內(nèi)凋亡相關(guān)蛋白(IGF-1,PI3K,Akt, p-Akt,caspase-3,Bcl-2,NR2B)的表達(dá)。
　　結(jié)果：組織學(xué)染色結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,高糖組2月齡子代大鼠海馬CA1, CA2,CA3區(qū)域的TUNEL染色陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)均顯著增加;Wes