Orexin-A誘導(dǎo)的ERK1-2激活對癲癇大鼠學(xué)習(xí)記憶及海馬神經(jīng)細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的：利用戊四氮(PTZ)慢性點(diǎn)燃癲癇模型探討orexin-A誘導(dǎo)的細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK1/2)激活對癲癇大鼠空間學(xué)習(xí)記憶和海馬神經(jīng)細(xì)胞增殖的影響。
　　 方法：取雄性Wistar大鼠6～8周齡，體重180～220g，隨機(jī)分為3組：①對照組(NS+NS)：腹腔注射生理鹽水，側(cè)腦室注射生理鹽水；②PTZ+NS：腹腔注射PTZ，側(cè)腦室注射生理鹽水；③PTZ+orexin-A(OXA)：腹腔注射PTZ，側(cè)腦室注射orexin-A

2、；④PTZ+U0126：腹腔注射PTZ，側(cè)腦室注射ERK拮抗劑U0126；⑤PTZ+U0126+OXA：腹腔注射PTZ，側(cè)腦室注射U0126和orexin-A；致癇組大鼠每日腹腔注射1％PTZ35mg/kg，連續(xù)30天，而對照組注射等量的生理鹽水。完全點(diǎn)燃的標(biāo)準(zhǔn)按Racine分級標(biāo)準(zhǔn)連續(xù)3次獲得Ⅳ級或以上的驚厥發(fā)作。通過Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測各組大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力，HE染色觀察海馬形態(tài)結(jié)構(gòu)變化，用免疫組化染色觀察海馬神經(jīng)細(xì)胞的增殖

3、變化。
　　 結(jié)果：⑴Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)：各組大鼠逃避潛伏期都相應(yīng)的縮短。與對照組比較，癲癇組(PTZ+NS)大鼠的平均潛伏期明顯延長(p<0.01)，而所在平臺象限的游泳時(shí)間縮短，以及穿越平臺的次數(shù)顯著減少(p<0.01)；然而側(cè)腦室注射orexin-A能明顯縮短癲癇大鼠的逃避潛伏期，延長所在象限的游泳時(shí)間，增加了穿越平臺的次數(shù)(p<0.05)。然而側(cè)腦室注射U0126能明顯延長癲癇大鼠的逃避潛伏期，縮短所在象限的游泳時(shí)間

4、，減少了穿越平臺的次數(shù)(p<0.05)。盡管與PTZ+U0126組比較，PTZ+U0126+OXA組大鼠逃避潛伏期明顯縮短，在原目標(biāo)象限停留時(shí)間以及穿越原平臺位置次數(shù)明顯增加(p<0.05)，但是與PTZ+OXA組比較時(shí)，大鼠逃避潛伏期反而延長，在原目標(biāo)象限停留時(shí)間和穿越原平臺位置次數(shù)均減少。⑵HE染色顯示慢性點(diǎn)燃癲癇大鼠海馬區(qū)部分神經(jīng)元核膜結(jié)構(gòu)不清楚，細(xì)胞周圍間質(zhì)明顯減少，細(xì)胞脫失明顯，只見散在的神經(jīng)元細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整。免疫組織化學(xué)熒光染

5、色顯示癲癇組大鼠海馬區(qū)BrdU陽性細(xì)胞數(shù)較對照組明顯增多(p<0.05)。側(cè)腦室注射ERK1/2拮抗劑U0126能顯著減少致癇大鼠海馬區(qū)BrdU陽性細(xì)胞數(shù)，當(dāng)應(yīng)用orexin-A后BrdU陽性細(xì)胞數(shù)明顯增多(p<0.05)，但是BrdU陽性細(xì)胞數(shù)低于PTZ+OREXIN組。
　　 結(jié)論：①PTZ慢性點(diǎn)燃癲癇大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力降低；②Orexin-A能改善癲癇大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶功能；③ERK1/2拮抗劑U0126能進(jìn)一步損害癲