NDRG1基因在肺腺癌細胞及組織中的表達及意義.pdf

1、目的研究NDRG1基因在肺腺癌中的表達及其在肺腺癌發(fā)生、發(fā)展中的意義。建立穩(wěn)定轉染含NDRG1的肺腺癌A549細胞株,探討NDRG1對A549細胞增殖與凋亡的影響及其可能的分子機制。
　　方法應用免疫組織化學方法檢測20例正常肺組織和94例肺腺癌組織中NDRG1、P21及VEGF蛋白的表達情況,并分析三者與其臨床病理參數的相關性。運用Spearman秩相關觀察三者蛋白表達的相關性。運用Kaplan-Meier生存曲線分析其表達與患

2、者預后的關系。經脂質體介導將含有NDRG1重組表達質粒轉染人肺腺癌A549細胞株,采用G418篩選陽性細胞克隆及實時熒光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白質印跡鑒定;qRT-PCR和蛋白質印跡檢測陽性細胞克隆P21及MDM2表達;MTT比色法檢測穩(wěn)定高表達NDRG1的N11克隆的增殖活性;流式細胞儀檢測穩(wěn)定高表達NDRG1的N11克隆的凋亡率。
　　結果(1)在正常肺組織、肺腺癌組織中NDRG1陽性率分別為90.0％(18/20)

3、和51.2%(49/94),P21陽性率分別為80.0%(16/20)和33.0%(31/94),VEGF陽性率分別為20.0%(4/20)和53.2%(50/94),差異均具有統(tǒng)計學意義。肺腺癌組織中NDRG1、P21的表達與淋巴結轉移情況呈負相關,VEGF的表達與淋巴結轉移情況呈正相關。NDRG1表達與P21表達呈正相關,NDRG1和P21表達與VEGF表達均呈負相關。單因素生存分析表明:NDRG1、P21和VEGF表達水平與生存顯

4、著相關,差異均有統(tǒng)計學意義。(2)成功建立高表達NDRG1的陽性A549細胞克隆(N11);N11細胞P21表達及細胞凋亡率顯著增高(P<0.05),而MDM2表達及細胞增殖顯著降低(P<0.05)。
　　結論(1)肺腺癌中NDRG1和P21表達下調,而VEGF表達上調,NDRG1和P21表達增加提示患者有較低的淋巴結轉移率,NDRG1可能為一個新的腫瘤轉移抑制基因,在肺腺癌發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮一定作用,NDRG1、P21和VEG