載藥EPCs生物工程捕獲支架在動物體內早期內皮化性能的初步研究.pdf

1、前言:
　　 血管阻塞性病變是一種對健康危害極大、自然預后差的常見疾病,隨著社會人口老齡化,這類疾病的發(fā)病率呈逐年上升趨勢。經過多年的臨床應用,藥物洗脫支架(drug-elutingstent,DES,特別是雷帕霉素支架)大大降低了血管再狹窄率(3-5%),表現(xiàn)出了廣闊的臨床應用前景。然而,藥物洗脫支架在抑制內膜增生的同時,也抑制了血管正常的內皮化進程,造成了DES置入后“內皮化延遲”現(xiàn)象,并相應地引起了“晚期血栓形成”等致命性

2、并發(fā)癥的發(fā)生。
　　 目前,一項新的促內皮化技術引起了國內外介入放射學界的廣泛關注,這就是通過動員外周血中EPCs到損傷血管局部位快速修復血管內皮。Kutryk等利用抗原抗體結合反應原理,在支架上涂層CD34+抗體以迅速吸附與捕獲外周血中CD34+的EPCs,并在極短時間內完成支架內皮化。但隨之一個不容忽視的問題出現(xiàn)了:EPCs在快速修復內皮的同時,也誘發(fā)了內膜過度增生,因此極易發(fā)生血管再狹窄。
　　 目的:
　　

3、 本實驗通過建立小型豬冠狀動脈再狹窄動物模型,來評價載藥EPCs生物工程捕獲支架能否在抑制內膜增生的同時,發(fā)揮早期快速內皮化作用。
　　 方法:
　　 選用27只25公斤以上的健康小型巴馬豬作為實驗動物(全雄性)選擇左或右冠狀動脈置入支架。實驗組:共9只,置入CD34+抗體-雷帕霉素支架。對照組:共18只,分為2組,每組9只。對照組A:置入雷帕霉素金屬支架;對照組B:置入CD34+抗體金屬支架。本實驗采用國際公認的小型

4、豬冠狀動脈球囊過度擴張再狹窄模型。隨訪終點時間:1周、2周進行掃描電鏡觀察.內皮化評估和4周用于組織病理學研究-再狹窄評估。
　　 結果:
　　 一、一般狀況
　　 27只小型豬手術操作均順利,所有支架均成功置入,術中即刻造影血管通暢。各觀察終點復查時冠狀動脈造影未見血管完全閉塞。處死動物后,心臟大體標本未見心肌梗死等明顯異常,支架置入處未見明顯組織增生。
　　 二、掃描電鏡結果
　　 1、1周觀

5、察終點的實驗結果
　　 掃描電鏡觀察,各組支架的內皮覆蓋已經出現(xiàn)了差異:首先雷帕霉素支架表面可見少量內皮覆蓋,而且內皮細胞間連接不緊密,排列較紊亂,但炎性細胞少見。然而,新型支架內皮化程度較雷帕霉素支架明顯提高,內皮細胞間連接相對比較緊密,排列較規(guī)則,部分可見典型梭形改變。對比之下,抗體支架內皮覆蓋率最高。
　　 2、14天隨訪終點結果
　　 從掃描電鏡觀察可以看出,各組支架的內皮覆蓋程度均比1周觀察終點時明顯提

6、高,細胞連接更緊密,部分內皮細胞已相互連接進而形成了新生內皮組織,特別是新型支架和抗體支架變化較明顯。然而,我們同時也發(fā)現(xiàn)各組支架仍然存在不同程度的內皮細胞形態(tài)發(fā)育畸形、排列紊亂,易脫落等現(xiàn)象,以雷帕霉素支架組為主,這間接反映出新生內皮功能缺陷。
　　 三、組織病理結果
　　 組織病理學顯示新型支架新生內膜面積明顯小于抗體支架對照組,實驗組新生內膜面積為1.94±0.84mm2,而抗體支架對照組新生內膜面積為2.80±0

7、.374mm2(P=0.024),兩者之間存在統(tǒng)計學差異。同時在新生內膜厚度和狹窄面積百分比(%)方面評估上看,新型支架分別為184.53±87.29μm、20.51±9.43%,而抗體支架對照組分別為276.25±108.36μm、33.74±11.85%(P=0.022,P=0.031),兩者之間依然存在較明顯的統(tǒng)計學差異。
　　 結論:
　　 本研究表明載藥EPCs生物工程捕獲支架置入實驗用小型豬體內在早期階段是安