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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:1、檢測(cè)原發(fā)性腎病綜合征(PNS)患兒不同時(shí)間點(diǎn)外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)細(xì)胞凋亡、P-糖蛋白170(P-gp170)的表達(dá)情況。
2、分析細(xì)胞凋亡與P-gp170表達(dá)的關(guān)系,探討其在糖皮質(zhì)激素(GC)耐藥中的可能機(jī)制及臨床意義。
方法:1、選取28例PNS患兒,依據(jù)口服強(qiáng)的松4周時(shí)尿蛋白的情況分為激素敏感組(SSNS組,16例)、激素耐藥組(SRNS組,12例),另設(shè)10例健康體檢兒童作為對(duì)照組。<
2、br> 2、對(duì)所有兒童分別于兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)采取外周血標(biāo)本:(1)強(qiáng)的松治療前:(2)強(qiáng)的松治療4周時(shí),采用密度梯度離心法進(jìn)行PBMC提取。
3、通過AnnexinV-PI雙染色,使用流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)PBMC細(xì)胞凋亡率。
4、通過P-gp170單克隆抗體,使用流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)PBMC細(xì)胞P-gp170表達(dá)情況。
5、對(duì)PBMC細(xì)胞凋亡率及P-gp170表達(dá)進(jìn)行
3、相關(guān)性分析。
結(jié)果:1、PBMC細(xì)胞凋亡率檢測(cè)GC治療前PBMC在SSNS組、SRNS組及對(duì)照組均有凋亡,凋亡率分別為(6.14±1.85)%、(6.44±1.83)%和(5.56±1.53)%,3組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與治療前比較,治療4周后SSNS組凋亡率增高為(11.48±6.25)%(P<0.01),SRNS組無明顯變化[(6.94±1.87)%,P>0.05]。
2、PBMC膜表面P
4、-gp170表達(dá)GC治療前P-gp170在SSNS組、SRNS組、對(duì)照組表達(dá)率分別為(4.54±3.10)%、(11.78±4.52)%和(2.30±2.07)%,3組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),SRNS組高于其他2組,SSNS組高于對(duì)照組;治療后P-gp170在SSNS組、SRNS組的表達(dá)率較治療前增高為(7.29±2.69)%、(15.36±4.36)%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01),且SRNS組高于SSNS組(P<0
5、.01)。
3、PBMCP-gp170與細(xì)胞凋亡的相關(guān)性PBMC細(xì)胞凋亡與P-gp170表達(dá)未見線性相關(guān)(r=-0.174,P>0.05)。
結(jié)論:1、健康兒章和PNS患兒PBMC均有P-gp170的表達(dá),且PNS患兒P-gp170表達(dá)高于健康兒章。
2、外周血P-gp170表達(dá)增高可能與PNS患兒GC耐藥有關(guān)。
3、PBMC的凋亡延遲可能參與PNS患兒GC耐藥。
4
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