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文檔簡介
1、目的: 通過研究針刺對局灶性腦缺血大鼠海馬CA1區(qū)微循環(huán)灌流量、葡萄糖代謝、微血管內(nèi)皮細胞轉(zhuǎn)運相關(guān)蛋白表達的影響,研究針刺對微血管內(nèi)皮細胞轉(zhuǎn)運功能的影響,探討針刺治療缺血性腦中風(fēng)的機制。 方法: 1.Wistar大鼠200只隨機分為假手術(shù)對照組、模型組、針刺內(nèi)關(guān)組和針刺地機組,各組再隨機分為第15天和第30天觀察組,共八個組。采用穿線阻塞大腦中動脈法建立局灶性腦缺血大鼠模型(MCAO)。 2.造模后第15
2、、30天應(yīng)用激光多普勒微循環(huán)血流分析儀,檢測各組大鼠針刺后海馬CA1區(qū)微循環(huán)血流量的變化。 3.腦組織勻漿檢測葡萄糖、丙酮酸、乳酸、Ca2+的含量和谷氨酸濃度。 4.HE染色觀察腦組織神經(jīng)細胞的形態(tài)學(xué)變化并計算缺血側(cè)海馬CA1區(qū)神經(jīng)元壞死率。 5.免疫組織化學(xué)測定葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(Glucose transporter1,GLUT-1)及P-糖蛋白(P-Glycoprotein,P-gp)在MCAO大鼠缺血側(cè)海馬
3、CA1區(qū)微血管內(nèi)皮細胞的表達。 6.蛋白質(zhì)印跡(Western blotting)方法測定GLUT-1及P-gp在腦組織內(nèi)的相對含量。 結(jié)果: 1.本實驗采用穿線阻塞大腦中動脈法成功建立了局灶性腦缺血大鼠模型(MCAO)。 (1)針刺內(nèi)關(guān)組MACO大鼠海馬CA1區(qū)的微循環(huán)血流量明顯高于同時間段模型組和針刺地機組,具有顯著性差異。 (2)針刺內(nèi)關(guān)組大鼠腦組織乳酸含量、谷氨酸濃度、Ca2+的含量明顯降
4、低,葡萄糖和丙酮酸的含量明顯升高,具有顯著性差異。 (3)針刺內(nèi)關(guān)組大鼠缺血側(cè)海馬CA1區(qū)神經(jīng)元的死亡率明顯低于同時間段模型組大鼠,具有顯著性差異。 2.免疫組化法測定GLUT-1和P-gp在MCAO大鼠缺血側(cè)海馬CA1區(qū)微血管內(nèi)皮細胞的表達數(shù)及積分光密度值(IOD),結(jié)果顯示針刺內(nèi)關(guān)組明顯高于模型組和同時間段針刺地機組,差異具有顯著性。 3.Western blotting測定GLUT-1在MCAO大鼠腦組織的
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