短暫性腦缺血再灌注損傷對老年大鼠神經(jīng)功能的影響極其機(jī)制的研究.pdf

1、目的：探討短暫性腦缺血再灌注損傷對老年大鼠海馬神經(jīng)元損傷及認(rèn)知功能的影響并對及機(jī)制進(jìn)行研究。
　　方法：健康老年雄性W istar大鼠40只，隨機(jī)分為對照組和缺血組，每組20只。按Pulsineli方法建立四動脈阻斷法全腦缺血模型，缺血時間為5min。缺血后第2-7天應(yīng)用M orris水迷宮進(jìn)行行為學(xué)檢測。行為學(xué)檢測完成后每組隨機(jī)取10只大鼠經(jīng)心臟灌注后取腦制作石蠟切片，分別行染色和TUNEL法檢測海馬神經(jīng)元凋亡。剩余10只大鼠冰

2、上斷頭取腦后提取海馬組織，純化線粒體蛋白進(jìn)行二維雙向電泳和凝膠圖像分析，對差異蛋白質(zhì)行基質(zhì)輔助激光解吸電離-飛行時間質(zhì)譜分析，應(yīng)用Mascot Distiller搜索引擎檢索NCBInr數(shù)據(jù)庫鑒定蛋白質(zhì)。
　　結(jié)果：M orris水迷宮檢測發(fā)現(xiàn)，在第1天的測試中，兩組大鼠逃避潛伏期差別無統(tǒng)計學(xué)意義，與對照組相比，缺血組第2-4天的逃避潛伏期明顯延長(P＜0.05或P＜0.01)，第5天測試的學(xué)習(xí)潛伏期缺血組明顯長于對照組(P＜0.

3、05)；TUNEL凋亡神經(jīng)元計數(shù)缺血組海馬神經(jīng)元凋亡神經(jīng)元計數(shù)較假手術(shù)組明顯升高，每個高倍鏡視野凋亡神經(jīng)元計數(shù)對照組和缺血組分別為3.21±3.76和20.50±5.83，差別有顯著統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01)。差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究顯示缺血組大鼠腦海馬線粒體蛋白表達(dá)存在顯著差異，蛋白雙向電泳圖譜中有10個點(diǎn)表達(dá)量與對照組有顯著差異，其中有7個點(diǎn)表達(dá)量增高，3個點(diǎn)表達(dá)量降低。經(jīng)質(zhì)譜分析鑒定出10個蛋白。
　　結(jié)論：老年腦對缺血再灌注損傷